HE染色注意事項(xiàng):1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則無(wú)論進(jìn)行那種染色都會(huì)發(fā)生困難。脫蠟時(shí)間要充分,若溶蠟劑使用過(guò)久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低,若室溫過(guò)低,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過(guò)氧化物,必須過(guò)濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過(guò)三、四百?gòu)埱衅螅?huì)減弱,著色不鮮艷,呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液。 3.染色的時(shí)間長(zhǎng)短需依據(jù):染劑對(duì)組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間。 4.分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過(guò)淡,過(guò)深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復(fù)染后,組織會(huì)呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。 5.還原液不宜過(guò)濃,若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復(fù)染過(guò)深胞核會(huì)不清晰,影響鏡檢。 心臟組織HE染色如何觀察。甘肅靠譜的HE染色多少錢
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡(jiǎn)稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本、使用*****的技術(shù)方法。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來(lái)。廣西靠譜的HE染色多少錢腦組織HE染色如何觀察?
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存。經(jīng)過(guò)HE染色,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色。可以觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整,組織有無(wú)損傷;然后看切片有無(wú)刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見(jiàn),胞核與包漿要對(duì)比鮮明。
HE染色反藍(lán)的原理:蘇木素染液,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化:蘇木素染色之后,用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,但是在細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,把這個(gè)過(guò)程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使色素與組織解離,分化不可過(guò)度。藍(lán)化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),而呈藍(lán)色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,稱藍(lán)化作用,一般多用自來(lái)水浸洗即可變藍(lán),也可用溫水(50度溫水比較好)變藍(lán)。HE染色取材、染色以及分析方法介紹。
HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡(jiǎn)稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白液體呈粉紅色。脾臟組織HE染色如何觀察。湖北值得信賴的HE染色外包
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HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過(guò)高、過(guò)熱,在石蠟停留的時(shí)間過(guò)長(zhǎng);(2)固定時(shí)間太短,接下來(lái)就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對(duì)策:理論上來(lái)說(shuō),加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過(guò)長(zhǎng)時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開(kāi)始。甘肅靠譜的HE染色多少錢