免疫組化的優缺點
免疫組化的優點在于其高特異性和敏感性,能夠在組織原位檢測目標蛋白的表達和分布。此外,免疫組化可以與其他技術(如熒光顯微鏡、電子顯微鏡)結合,提供更豐富的信息。然而,免疫組化也存在一些缺點。首先,實驗步驟復雜,需要優化多個參數(如一抗濃度、孵育時間)。其次,免疫組化的結果可能受到組織固定、抗原修復等因素的影響,導致假陽性或假陰性結果。此外,免疫組化的定量分析相對困難,通常只能進行半定量分析。 在南京英瀚斯做的免疫組化,效果不錯!陜西小鼠免疫組化推薦
在臨床應用中,免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學基礎對cancer進行分類很困難。如胃腸道梭形細胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質起源的胃腸道間質瘤(GIST),還是神經起源的神經鞘瘤;同樣發生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細胞cancer,兩者較難區別,且醫療與預后明顯的不同,但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區別:角蛋白陰性則為精原細胞cancer,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。陜西小鼠免疫組化推薦哪里可以做免疫組化?
免疫組化臨床應用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類,初步區分組織學類型用非特異性抗體,在其基礎上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現出角蛋白,這同時也強調了在cancer診斷中應使用一組抗體而不是單個抗體。如果您有實驗外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進行聯系,我們也有做免疫組化的服務!
免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?
1、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。
2、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數。若不行,還可高壓修復。
3、組織切片本身這種抗原含量低。
4、血清封閉時間過長。
5、DAB孵育時間過短。
6、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。
7、開始做免疫組化,建議一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等問題。 免疫組化的那些小知識,都在這里!
醫療和預后有關的免疫組化。與醫療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫療與預后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,表達指數越高,表明其增殖指數越活躍,惡性度增高,預后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發現Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結轉移率高,并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應用更為范圍廣的的是子宮內膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床醫療中是否需要加入內分泌ji素阻斷醫療,并能判斷預后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫療反應良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化常見問題原因分析!山東細胞免疫組化怎么選擇
免疫組化公司哪家好?陜西小鼠免疫組化推薦
目前幾種常用免疫組化方法簡單介紹
1)免疫熒光方法是**早建立的免疫組織化學技術。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便,所以在臨床病理診斷、檢驗中應用較廣。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。
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2)免疫酶標方法免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前**常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,對比度好,染色標本可長期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發展非常迅速,已經衍生出了多種標記方法,且隨著方法的不斷改進和創新,其特異性和靈敏度都在不斷提高,使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測系統等。
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