多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramide signal amplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。 然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。 為啥高分的文章用的都在做細胞因子的檢測?分子生物標志物
高通量蛋白組學(Olink) LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術平臺,用心服務,現有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCR Array、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業的實驗室技術平臺,助推科研進步! 產品特點:采用獨有的 PEA,Proximity Extension Assay,鄰位延伸分析技術檢測蛋白標志物。 帶有特有的核苷酸序列探針的一對抗體與被檢測蛋白特異性結合后,正確且鄰位探針通過末端5bp配對堿基互補結合,在延伸酶的作用下形成雙鏈模板,利用qPCR或NGS進行檢測,通過特異性的核苷酸序列信號來反應檢測蛋白質的含量。外源性生物標志物LabEx多因子檢測作為高效的檢測手段,被廣泛應用在多種疾病研究中。
抗體芯片技術服務包括: 1.樣品蛋白質抽提: a.實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。 b.實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。 c.實驗對象為血清,則直接進入步驟3。 2.蛋白質定量:按蛋白質定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。 3.細胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育 a.細胞因子抗體芯片封閉后加入 50-500ug蛋白質(若標本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。 b.加入標記好的抗體室溫孵育1小時。 4.抗體芯片檢測 5.提供實驗報告: 包括詳細的實驗方法和芯片實驗結果的各種圖表和數據比較。 您只需提供保存完好的標本(血清、組織或細胞、細胞上清或其他非常規液質生物樣本),本公司專業的技術服務人員就可替您完成實驗操作與數據分析。
基于流式平臺CBA: CBA(Cytometric Bead Array),即微量樣本多指標流式蛋白定量技術是一個基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。 CBA的原理 通過利用一系列帶有熒光標記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統中的待測物,通過對應各種不同檢測物的特異微球上所帶有熒光強度不同從而同時測定分析樣本中多種可溶性成分的數量。 CBA的特點: 1. 能夠同時對單個樣本進行多種檢測。 2. 較傳統檢測節省樣本量9倍。 3. 靈敏度高、重復性好。 4. 所有分析只需一組標準曲線。 5. 避免酶聯反應所致人工假象。 6. 節省操作和檢測時間。 蛋白分析實驗技術——MSD超敏電化學發光平臺。
LUMINEX常見問題及解答(二) 6) 客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測? Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發Luminex試劑盒的經驗。但是,需要一系列的開發工作才能保證結果的特異性、重復性和可靠性。 7) 除了蛋白,LUMINEX技術是否還可以用于其它指標的檢測? 可以用于基因表達,基因多態性和HLA配型分析。 8) 如何判定 LUMINEX數據表達水平差異有無意義? 表達差異主要取決于標本的性質和數量,我們公司為客戶提供專業的數據統計服務。 9) LUMINEX實驗和流式細胞儀的優劣比較? Luminex技術是流式細胞儀和微球相結合的蛋白、核酸檢測技術, 檢測對象是蛋白質、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數目大,是一種高通量檢測技術。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。 由此可見,兩種方法應用方向有很大差別。 LabEx提供多音字檢測服務!msd超敏多因子價格
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酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。 基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。 測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。?其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀) 加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。?分子生物標志物
上海樂備實生物技術有限公司總部位于古丹路15號18號樓4樓,是一家從事生物科技、生物制品、醫藥科技領域的技術開發、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,檢驗技術的研發,從事貨物及技術的進出口業務,化工產品及原料(除危險化學品、監控化學品、易制毒化學品)、實驗室耗材與設備的銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】的公司。樂備實生物深耕行業多年,始終以客戶的需求為向導,為客戶提供***的標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務。樂備實生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。樂備實生物始終關注醫藥健康市場,以敏銳的市場洞察力,實現與客戶的成長共贏。