產生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。想進行代謝因子相關研究嗎?指標的選擇很重要,選擇Labex,給你更多的panel,總有你想做的指標。Thrombopoietin
多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。共刺激因子LabEx提供 細胞因子與信號通路蛋白多指標檢測。
LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應用于哪些領域?生物醫學研究,生物標記物開發,臨床檢測等領域。Luminex技術主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息?檢測蛋白和基因的數目主要取決于試劑盒。蛋白質檢測目前可以達到50個左右,基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產品經過了嚴格的質量控制。同時,我們檢測公司也有近15年的經驗、嚴格的操作程序和質量控制體系。
LabEx可提供的服務及優勢(一)LabEx服務的優勢:1、專業的抗體公司;2、先進的實驗儀器平臺;3、可靠、放心的結果;4、實惠、親民的價格;5、認真、嚴謹的工作態度。ELISA:將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。流式檢測服務:流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置,它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量。并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。抗體芯片:具有微型化、集成化、高通量的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉導、蛋白組學、腫塊物及其他疾病的相關研究。LabEx 流式平臺:BD C6,BD celesta,BD calibur,12色流式檢測分析。
LabEx多因子檢測技術應用★檢測樣本:血清、血漿、眼淚、房水、唾液、體腔灌洗液、細胞培養液上清、細胞裂解物等等各種液相樣本中可溶性細胞因子、炎癥因子、趨化因子、酶等的濃度檢測★腫塊物研究及腫塊物疾病的輔助診斷、療效和預后監測★干細胞研究和干細胞醫治監測★免疫學研究和免疫疾病的輔助診斷和監控★疾病的研究及輔助診斷和療效評價★免疫功能監測★藥效評價,藥物研發、疫苗研究★細胞信號傳導中磷酸化蛋白、凋亡相關蛋白定量分析LabEx服務為您提供完整的實驗結果報告,包括數據分析結果,原始數據文件,實驗protocol等。電化學發光,一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應,是電化學和化學發光兩個過程的完美結合。共刺激因子
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酶聯免疫斑點技術(Elispot)特點:酶聯免疫斑點技術Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設計在96孔培養板上進行,直接以培養板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質,包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養板的孔內加入細胞培養基(現在無血清ELISPOT技術已經成熟,培養基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養。Thrombopoietin
上海樂備實生物技術有限公司擁有從事生物科技、生物制品、醫藥科技領域的技術開發、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,檢驗技術的研發,從事貨物及技術的進出口業務,化工產品及原料(除危險化學品、監控化學品、易制毒化學品)、實驗室耗材與設備的銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】等多項業務,主營業務涵蓋標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務。一批專業的技術團隊,是實現企業戰略目標的基礎,是企業持續發展的動力。公司業務范圍主要包括:標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務等。公司奉行顧客至上、質量為本的經營宗旨,深受客戶好評。公司憑著雄厚的技術力量、飽滿的工作態度、扎實的工作作風、良好的職業道德,樹立了良好的標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務形象,贏得了社會各界的信任和認可。