抗體芯片實驗室服務思考留給科研,實驗外包出去!抗體芯片是蛋白芯片的一種,具有微型化、集成化、高通量化的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉異、蛋白質組學、**及其他疾病的相關研究。抗體芯片檢測的樣本類型包括提取物、細胞培養上清、血清血漿等,檢測的方式通過生物素標記的方法完成樣本標記,然后芯片孵育,樣本中相關蛋白與芯片上特異性抗體結合,通過熒光的方式使用芯片掃描儀檢測。實驗獲得的數據將通過標準的數據處理流程進行分析。抗體芯片檢測的優點:靈敏度高、特異性好、重復性佳、準確性高抗體芯片的檢測內容包括:抗體芯片主要用于蛋白表達譜、蛋白質磷酸化及蛋白質相互作用等檢測LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長因子等高通量高靈敏檢測。全蛋白組芯片萊美藥業
LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術經典炎癥十因子、高通量細胞因子初篩液相懸浮芯片:高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯到不同熒光標記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。進一步加入生物素標記的高親和配對二抗結合SA-PE進行信號放大,以實現對多種微量細胞因子的有效檢測。利用梯度稀釋的標準品檢測信號構建標準曲線,實現大量目標樣本中多因子的同時檢測和準確定量。特點1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸2、既能用于臨床,又能用于多學科科研領域3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標4、在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平全血磁珠分選培養PCR Array:用于檢測生物學功能相關的一系列基因的表達量變化,發現變化比較明顯的標志性基因。
抗體芯片技術服務包括:1.樣品蛋白質抽提:a.實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實驗對象為血清,則直接進入步驟3。2.蛋白質定量:按蛋白質定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。3.細胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(若標本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。b.加入標記好的抗體室溫孵育1小時。4.抗體芯片檢測5.提供實驗報告:包括詳細的實驗方法和芯片實驗結果的各種圖表和數據比較。您只需提供保存完好的標本(血清、組織或細胞、細胞上清或其他非常規液質生物樣本),本公司專業的技術服務人員就可替您完成實驗操作與數據分析。
免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。LabEx提供多音字檢測服務!
多重熒光免疫組化技術優勢1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔心抗體交叉反應,以及一抗二抗種屬匹配問題,減少了實驗設計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。2.TSA技術可以用于檢測用傳統方法無法檢出的低豐度靶標。基于酪酰胺的信號放大技術能夠提供極強的敏感度、檢測極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量,節約抗體,實測確實可以提升抗體的稀釋比例。3.熒光法多重免疫組化,可同時進行五個顏色通道以上,這種情況下發射光譜會重疊,我們可以借助多光譜成像系統來解決這個問題。這是傳統間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實反映關鍵蛋白的表達情況和相互之間的關系,從而極大地節約珍貴的樣品。LabEx 藥物篩選平臺:激酶抑制劑篩選,免疫檢查點,GPCR,抗體藥研發,蛋白互作。抗體芯片數據處理
生物標志物開發與研究。全蛋白組芯片萊美藥業
酶聯免疫斑點技術(Elispot)特點:酶聯免疫斑點技術Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設計在96孔培養板上進行,直接以培養板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質,包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養板的孔內加入細胞培養基(現在無血清ELISPOT技術已經成熟,培養基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養。全蛋白組芯片萊美藥業
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