免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。流式細胞術(flow cytometry,FCM)是一項新型的、發展迅速的生物醫學分析技術。生長因子篩查
LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術平臺,用心服務,現有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業的實驗室技術平臺,助推科研進步!多因子檢測技術包括Luminex、MSD、CBA、AntibodyArray,一份樣本可檢測幾十種不同的生物分子,可實現高通量、高靈敏度等特點免疫組化可通過HE、IF、Tunel、DAB、Nissl、Masson染色等,對指標進行定位分析,并且可提供病理分析平臺。流式細胞術通過不同熒光對同一細胞進行對參數分析,可提供細胞的12色染色。檢測速度快,分析樣本量大,包含的樣本種類多。IFNW1生物標志物開發與研究。
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實驗服務,提供樣本細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費用另計)。
問:因子檢測技術有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數量,建議是4的倍數,否則會造成浪費。LabEx數字病理圖像分析平臺,為您提供病理圖像分析的全套解決方案。
Q:多因子實驗還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實驗中血清好檢測,還是血漿好檢測?A:文獻報道EDTA的血漿適合做多因子實驗,具體需研究者根據自己實際條件選擇。Q:為什么要做預實驗?A:試劑說明書中的樣本稀釋比例不精確,需要進一步確認。預實驗主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測范圍內,從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過高,導致結果不準確。3.讓研究者在正式實驗中有選擇的依據。Q:血清血聚溶血,對實驗結果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細胞破裂導致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴重程度看區別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻上看沒有明確的數據支持。LabEx 多因子檢測平臺:抗體芯片,液相芯片,電化學技術為主的多種檢測技術。生長因子篩查
高通量蛋白組學(Olink)采用獨有的 PEA,鄰位延伸分析技術檢測蛋白標志物。生長因子篩查
酶聯免疫斑點技術(Elispot)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術平臺,用心服務,現有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業的實驗室技術平臺,助推科研進步!隨著酶免疫分析技術在醫學及生物學領域的較廣的應用,使體外檢測各種細胞因子和抗體研究有了新的突破。在研究免疫應答機制時,以往人們常用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測體液中游離的細胞因子(CK)或抗體,但由于游離的循環抗體或CK半衰期不同,使之在體液中不斷地被代謝,而不能確切地反應體內抗體及CK水平。80年代中期等根據ELISA技術的基本原理,建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯免疫斑點(ELISPOT)技術,因其具有較高的特異性和敏感性,目前正被國內外較廣的應用,對探索自身免疫系統疾病發病機制具有重要意義。生長因子篩查
上海樂備實生物技術有限公司致力于醫藥健康,是一家生產型的公司。公司業務分為標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術服務等,目前不斷進行創新和服務改進,為客戶提供良好的產品和服務。公司注重以質量為中心,以服務為理念,秉持誠信為本的理念,打造醫藥健康良好品牌。樂備實生物秉承“客戶為尊、服務為榮、創意為先、技術為實”的經營理念,全力打造公司的重點競爭力。