多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。LabEx提供 Luminex——xMAP技術—微球。輝瑞 蛋白芯片
免疫組化技術是用標記物標記的抗體與組織或細胞的抗原(如蛋白質、多肽、酶、***、病原體以及受體等)反應,結合形態學檢查,對抗原作定性、定量、定位檢測的技術。目前通常選用免疫酶組化間接染色法進行實驗,利用該技術可進行細胞、亞細胞水平的檢測。**近幾年,分子生物學研究異常活躍,但**終還要歸到形態上來。用免疫組織化學方法對所研究的大分子進行定位,進而深入研究其功能。分類:免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等特點:具有特異性強、靈敏度高及能將形態研究與功能、代謝研究有機地結合在一起實驗標本:實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。抗體:免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體蛋白芯片c12 對應什么LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗體芯片在內的多因子檢測服務。
PCRArray技術優勢:嚴格的質控●多個管家基因選擇,保證內參穩定性●基因組污染質控●逆轉錄質控●PCR質量質控極高的靈敏度●非常敏感的測定●25ng-5ugtotalRNA檢測一塊96孔板●500ng核酸可檢測到99%的基因●極限可達到1ng,啟用預擴增方案高靈敏度和寬動態范圍●寬動態范圍,以適應不同水平的初始基因表達高度特異性●每一對引物都經過濕實驗驗證,單峰解離曲線確保●難以設計特異性引物的基因具有高度特異性穩定的重現性●不同的操作者,不同的儀器都呈現較好的重現性提供專業的實驗服務和完整的實驗報告●試劑打包:只需提供樣本,試劑+檢測一站式服務●技術支持:實驗中任何問題均可得到對應技術解答●實驗報告:提供完整的實驗結果和和完整的實驗報告(包括實驗材料實驗步驟等)可檢測多種類型的樣本:
Luminex液相芯片檢測實驗技術服務原理:Luminex:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達500個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。目前,Luminex試劑盒已經可以檢測500多種蛋白質分子,包括細胞因子、自身抗體、腫塊物標志物等。高通量蛋白組學(Olink)采用獨有的 PEA,鄰位延伸分析技術檢測蛋白標志物。
單細胞功能組學(IsoPlexis)技術優勢>在看似同質的細胞亞群內研究異質性>利用功能蛋白質數據層和免疫細胞比較免疫應答情況>通過多功能強度指數(PSI)建立參考點>優化試驗以預測區分應答者和非應答者>表征導致身體狀況/應答的生物學和功能驅動因素技術原理采用微流控技術,通過12,000個亞納升級別的微室同時捕獲上千個單細胞。搭配IsoCode芯片抗體條形碼技術,捕獲每個小室中單個活細胞分泌的多重蛋白質,或者對單細胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進行捕獲,然后通過基于ELISA原理的全自動化蛋白檢測技術,捕獲多重蛋白的熒光信號,一次可采集多達30種以上的功能蛋白質。在檢測中從每個單細胞獲得的蛋白質組信號將無縫傳輸到IsoSpeak生信分析軟件,進行全自動分析和可視化呈現,并可直接用于文章發表。本panel可檢測以下因子:IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-10,IL-12 (total),KC/GRO,TNF-α 種屬:Mouse。蛋白芯片c12 對應什么
本panel可檢測以下因子:GM-CSF,Granzyme A,Granzyme B,IFN-γ,IL-2,TNF-α 種屬:Human。輝瑞 蛋白芯片
液態流式技術(Luminex)流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為中心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,可一管同時準確定量檢測2-100種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體、配體識別分析等多方面、多領域的研究。基本原理:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區分100種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術,可以同時檢測高達100個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。輝瑞 蛋白芯片
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