產生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；4)、非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果；5)、DAB孵育時間過長或濃度過高；6)、PBS沖洗不充分，殘留抗體結果增強著色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要；7)、標本染色過程中經常出現干片，這容易增強非特異性著色。CBA，細胞因子微球檢測技術，是一個基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法。HBEGF

LUMINEX常見問題及解答（一）1)LUMINEX應用于哪些領域?生物醫學研究，生物標記物開發，臨床檢測等領域。Luminex技術主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何？靈敏度取決于開頭的質量。對于同樣的抗體對，Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的？血清、血漿是常用的樣本，每次檢測需要10ul，每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術檢測，制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息？檢測蛋白和基因的數目主要取決于試劑盒。蛋白質檢測目前可以達到50個左右，基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結果的特異性？檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司，產品經過了嚴格的質量控制。同時，我們檢測公司也有近15年的經驗、嚴格的操作程序和質量控制體系。MIP-4LabEx多因子檢測技術應用。

1)除了蛋白，LUMINEX技術是否還可以用于其它指標的檢測？可以用于基因表達，基因多態性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX數據表達水平差異有無意義？表達差異主要取決于標本的性質和數量，我們公司為客戶提供專業的數據統計服務。3)LUMINEX實驗和流式細胞儀的優劣比較?Luminex技術是流式細胞儀和微球相結合的蛋白、核酸檢測技術，檢測對象是蛋白質、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數目大，是一種高通量檢測技術。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子，而且檢測速度較慢，不適合高通量分析。由此可見，兩種方法應用方向有很大差別。4)如何控制LUMINEX檢測的質量？我們對每一次檢測都設定標準曲線，并設定內參進行校正。我們會定期做儀器校正，檢測精密度和重復性實驗以確保檢測結果的可靠性。

酶聯免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。基本原理：它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產生顏色反應，用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時，抗原（抗體）先結合在固相載體上，但仍保留其免疫活性，然后加一種抗體（抗原）與酶結合成的偶聯物（標記物），此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性，當偶聯物與固相載體上的抗原（抗體）反應結合后，再加上酶的相應底物，即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原（抗體）含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計（酶標儀）加以測定。其方法簡單，方便迅速，特異性強。LabEx 提供人、小鼠、大鼠：炎癥反應、免疫調節、信號通路重要指標多因子組合檢測。

LabEx隆重推出抗體相關服務：FC、ELISA、多因子檢測、抗體芯片……酶聯免疫吸附測定（enzyme-linkedimmunosorbentassay簡稱ELISA）是在免疫酶技術（immunoenzymatictechniques）的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術,ELISA過程包括抗原（抗體）吸附在固相載體上稱為包被，加待測抗體（抗原）,再加相應酶標記抗體（抗原）,生成抗原（抗體）--待測抗體（抗原）--酶標記抗體的復合物，再與該酶的底物反應生成有色產物。借助分光光度計的光吸收計算抗體（抗原）的量。待測抗體（抗原）的定量與有色產生成正比。LabEx多因子檢測技術－－液相懸浮技術。黏膜生長因子

LabEx提供MSD超敏電化學發光平臺服務！HBEGF

流式多因子檢測技術(CBA)微球免疫分析系統CBA（CytometricBeadArray）是一個基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法，它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。CBA是種結合流式細胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應用技術，可以輕松的在短時間內，同時檢測多種蛋白，其作用原理利用熒光強度不同的微球，上面帶有可以辨認特定蛋白的抗體（captureantibody），與樣本（例如血清、血漿、培養上清液、細胞裂解液等）及PE檢測抗體（detectionantibody）作用后，以流式細胞儀進行分析，根據PE熒光強度的不同用FCAPArray軟件進行分析和標準品做比對后，可進行樣本內特定，蛋白的定性或定量。CBA具有以下優點：每次檢測需25-50ul樣本；靈敏度可達0.274pg/ml時間t夬速，需3-4小時，快速上樣可同時測定30種蛋白，實驗可重復性高利用FCAPArray軟件，不論樣本數目多少，可快速分析完成分析HBEGF

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