1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究，生物標記物開發(fā)，臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何？靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對于同樣的抗體對，Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的？血清、血漿是常用的樣本，每次檢測需要10ul，每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測，制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息？檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測目前比較高可以達到50個左右，基因檢測比較高達500個。5)如何保證檢測結(jié)果的特異性？檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司，產(chǎn)品經(jīng)過了嚴格的質(zhì)量控制。同時，我們檢測公司也有近15年的經(jīng)驗、嚴格的操作程序和質(zhì)量控制體系。6)客戶自己提供抗體，是否可以進行LUMINEX檢測？Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗。但是，需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。LabEx多因子檢測技術(shù)（包括luminex、MSD等），所需樣本量少，檢測指標豐富。mtor信號通路

Luminex：應(yīng)用微球和流式細胞儀的原理，微球內(nèi)部含有三種免疫熒光，通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此，利用微球技術(shù)，可以同時檢測高達500個蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體，不同的微球在一定程度上可以自由組合，這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以**減少生物樣品的消耗量，節(jié)省成本和測定時間，并且使多種目標分子之間相關(guān)性的分析更加準確。目前，Luminex試劑盒已經(jīng)可以檢測500多種蛋白質(zhì)分子，包括細胞因子、***、自身抗體、**標志物等。線粒體信號通路本panel可檢測因子：IL-9,IL-15,IL-17A/F,IL-27p28/IL-30,IL-33,IP-10,MCP-1,MIP-1α,MIP-2 種屬：Mouse。

酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)（Elispot）特點：酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)，能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設(shè)計在96孔培養(yǎng)板上進行，直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì)，包被上特異性的單克隆抗體，用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程，對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體，該抗體需要無毒，親和力高等特點。)之后，在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟，培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。

Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標記的磁珠上，將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時，一束激光照射磁珠上的熒光，識別磁珠標記的捕獲抗體，從而獲知該磁珠可檢測哪種細胞因子，從而實現(xiàn)“定性”作用。進一步，通過加入生物素標記的高親和配對檢測抗體，同步識別磁珠抓取的目標細胞因子，形成“三明治”結(jié)構(gòu)，并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素，通過另一束激光照射進行信號放大檢測，實現(xiàn)“定量”作用。本panel可檢測以下因子：Adiponectin,sE-Selectin,sICAM-1 種屬：Rat。

MSD經(jīng)典10因子推薦：中檢院《CAR-T細胞醫(yī)治產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到，使用MSD技術(shù)檢測CAR-T細胞醫(yī)治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術(shù)－電化學(xué)發(fā)光和點陣技術(shù)MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學(xué)發(fā)光免疫分析）技術(shù)是基于ELISA基本原理的升級，在板底通電從而激發(fā)標記物SULFO-TAG發(fā)光并由CCDCamera進行信號采集；MSDECL技術(shù)提高免疫分析的靈敏度，延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術(shù)，在96孔石墨電極板里可實現(xiàn)10個指標每孔的檢測，同時實現(xiàn)多個指標定量。MSD技術(shù)獨具一格的“六合一”特點：亞fg/ml靈敏度，低背景，多靶點檢測，6個數(shù)量級線性范圍，適用于不同樣本基質(zhì)（血清／血漿，細胞培養(yǎng)上清，腦脊液，尿液，組織勻漿，細胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）,5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供；檢測我們來做，助您的時間更有價值！本panel可檢測以下因子：BDNF,FGF-21,Ghrelin (total),Glucagon,Leptin 種屬：Mouse。流式細胞圖怎么分析

本panel可檢測以下因子：IP-10,KC/GRO,MCP-1,MIP-1α,MIP-1β,MIP-2,MIP-3α 種屬：Mouse。mtor信號通路

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；4)、非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果；5)、DAB孵育時間過長或濃度過高；6)、PBS沖洗不充分，殘留抗體結(jié)果增強著色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要；7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片，這容易增強非特異性著色。mtor信號通路

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