LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應用于哪些領域?生物醫學研究,生物標記物開發,臨床檢測等領域。Luminex技術主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息?檢測蛋白和基因的數目主要取決于試劑盒。蛋白質檢測目前可以達到50個左右,基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產品經過了嚴格的質量控制。同時,我們檢測公司也有近15年的經驗、嚴格的操作程序和質量控制體系。蛋白分析實驗技術——MSD超敏電化學發光平臺。IL17A
免疫組化技術是用標記物標記的抗體與組織或細胞的抗原(如蛋白質、多肽、酶、***、病原體以及受體等)反應,結合形態學檢查,對抗原作定性、定量、定位檢測的技術。目前通常選用免疫酶組化間接染色法進行實驗,利用該技術可進行細胞、亞細胞水平的檢測。 **近幾年,分子生物學研究異常活躍,但**終還要歸到形態上來。用免疫組織化學方法對所研究的大分子進行定位,進而深入研究其功能。 分類:免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等 特點:具有特異性強、靈敏度高及能將形態研究與功能、代謝研究有機地結合在一起 實驗標本:實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。 抗體:免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體IL19LabEx 多因子檢測平臺:抗體芯片,液相芯片,電化學技術為主的多種檢測技術。
Luminex液相懸浮芯片利用梯度稀釋的標準品檢測信號,構建標準曲線,還可對96孔微孔板中的樣品的多種細胞因子進行同步相對定量。Luminex液相懸浮芯片的技術優勢遠超傳統ELISA,特別適合大批量樣本中多個特定因子的定量檢測。由于Luminex懸浮芯片的規格是1張芯片可以檢測多達78例樣本,許多研究人員在日常實驗研究(例如動物實驗、細胞實驗)中往往只有十幾例到幾十例不等的樣品需要檢測,用整張Luminex芯片就存在浪費情況。為幫助廣大研究人員在樣本數量較少的時候也能夠享受Luminex芯片技術帶來高質量數據及便利。LabEx推薦出使用頻率和穩定性均靠前的Luminex芯片開展全國研究人員“拼板”業務。每張芯片多可檢測80例樣本,參與拼板的項目10例起拼,拼板成功立即啟動實驗,兩周內即出報告!
PCRArray技術優勢:嚴格的質控●多個管家基因選擇,保證內參穩定性●基因組污染質控●逆轉錄質控●PCR質量質控極高的靈敏度●非常敏感的測定●25ng-5ugtotalRNA檢測一塊96孔板●500ng核酸可檢測到99%的基因●極限可達到1ng,啟用預擴增方案高靈敏度和寬動態范圍●寬動態范圍,以適應不同水平的初始基因表達高度特異性●每一對引物都經過濕實驗驗證,單峰解離曲線確保●難以設計特異性引物的基因具有高度特異性穩定的重現性●不同的操作者,不同的儀器都呈現較好的重現性提供專業的實驗服務和完整的實驗報告●試劑打包:只需提供樣本,試劑+檢測一站式服務●技術支持:實驗中任何問題均可得到對應技術解答●實驗報告:提供完整的實驗結果和和完整的實驗報告(包括實驗材料實驗步驟等)可檢測多種類型的樣本:LabEx實驗服務項目涵蓋:基因蛋白細胞組織四個層面。
產生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。LabEx數字病理圖像分析平臺,為您提供病理圖像分析的全套解決方案。alpha-Synuclein
Luminex既能檢測蛋白,又能檢測核酸。IL17A
單細胞功能組學(IsoPlexis)技術優勢>在看似同質的細胞亞群內研究異質性>利用功能蛋白質數據層和免疫細胞比較免疫應答情況>通過多功能強度指數(PSI)建立參考點>優化試驗以預測區分應答者和非應答者>表征導致身體狀況/應答的生物學和功能驅動因素技術原理采用微流控技術,通過12,000個亞納升級別的微室同時捕獲上千個單細胞。搭配IsoCode芯片抗體條形碼技術,捕獲每個小室中單個活細胞分泌的多重蛋白質,或者對單細胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進行捕獲,然后通過基于ELISA原理的全自動化蛋白檢測技術,捕獲多重蛋白的熒光信號,一次可采集多達30種以上的功能蛋白質。在檢測中從每個單細胞獲得的蛋白質組信號將無縫傳輸到IsoSpeak生信分析軟件,進行全自動分析和可視化呈現,并可直接用于文章發表。IL17A
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