1)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標的檢測?可以用于基因表達,基因多態(tài)性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達水平差異有無意義?表達差異主要取決于標本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務。3)LUMINEX實驗和流式細胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù),檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內(nèi)的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應用方向有很大差別。4)如何控制LUMINEX檢測的質(zhì)量?我們對每一次檢測都設(shè)定標準曲線,并設(shè)定內(nèi)參進行校正。我們會定期做儀器校正,檢測精密度和重復性實驗以確保檢測結(jié)果的可靠性。本panel可檢測因子:C-Peptide,Ghrelin (total),GLP-1 (total),Insulin,Leptin,PYY (total) 種屬:Mouse。磁珠分選用的磁力架
本panel可檢測以下因子:HMW Adiponectin/Acrp30,ALCAM/CD166,alpha-Fetoprotein/AFP,Angiopoietin-like Protein 4/ANGPTL4,AP***RIL/TNFSF13,Atrial Natriuretic Peptide/ANP,beta 2-Microglobulin,BMP-4,BMP-7,BMP-10,C-Peptide,CA15-3/MUC-1,Calbindin D,CCL14/HCC-1/HCC-3,CCL15/MIP-1 delta,CCL24/Eotaxin-2/MPIF-2,Chemerin,Complement C5a,Cripto,CXCL1/GRO alpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRO beta/MIP-2/CINC-3,CXCL4/PF4,CXCL6/GCP-2,ENPP-2/Autotaxin,FABP4/A-FABP,Furin,HB-EGF,IL-3,IL-18/IL-1F4,IL-19,IL-28A/IFN-lambda 2,IL-33,Kallikrein 3/PSA,M-CSF,MFG-E8,Myeloperoxidase/MPO,NT-3,Periostin/OSF-2,Progranulin/PGRN,Renin,S100A9,SP-D,TFPI,Thrombomodulin/BDCA-3,TRAIL/TNFSF10,VEGF-C 種屬:Human流式細胞術(shù)配色本panel可檢測以下因子:Akt2 (total),Akt2 (Ser474) 種屬:Human,Mouse,Rat。
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。
酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)特點:酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設(shè)計在96孔培養(yǎng)板上進行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì),包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。本panel可檢測以下因子:FGF-basic,IL-15,IL-18,LIF,M-CSF,MIG/CXCL9,MIP-2,PDGF-BB,VEGF-A 種屬:Mouse。
Luminex液相芯片檢測實驗技術(shù)服務原理:Luminex:應用微球和流式細胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時檢測高達500個蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關(guān)性的分析更加準確。目前,Luminex試劑盒已經(jīng)可以檢測500多種蛋白質(zhì)分子,包括細胞因子、自身抗體、腫塊物標志物等。LabEx 免疫組化平臺:包埋,切片,染色,多重熒光組化,以及病理分析(HALO)。nod2的信號通路
本panel可檢測以下因子:Angiogenin,ApoE4,FABP3,Ferritin,Neurogranin,TREM2 種屬:Human。磁珠分選用的磁力架
Q:多因子實驗還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實驗中血清好檢測,還是血漿好檢測?A:文獻報道EDTA的血漿適合做多因子實驗,具體需研究者根據(jù)自己實際條件選擇。Q:為什么要做預實驗?A:試劑說明書中的樣本稀釋比例不精確,需要進一步確認。預實驗主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測范圍內(nèi),從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過高,導致結(jié)果不準確。3.讓研究者在正式實驗中有選擇的依據(jù)。Q:血清血聚溶血,對實驗結(jié)果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細胞破裂導致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴重程度看區(qū)別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻上看沒有明確的數(shù)據(jù)支持。磁珠分選用的磁力架
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