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BCA-1

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-18

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時(shí)間過長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長(zhǎng)二抗來源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果;5)、DAB孵育時(shí)間過長(zhǎng)或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標(biāo)本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。LabEx提供多音字檢測(cè)服務(wù)!BCA-1

1)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測(cè)?可以用于基因表達(dá),基因多態(tài)性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無意義?表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)服務(wù)。3)LUMINEX實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測(cè)技術(shù),檢測(cè)對(duì)象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測(cè)整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測(cè)蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測(cè)技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測(cè)幾種蛋白分子,而且檢測(cè)速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。4)如何控制LUMINEX檢測(cè)的質(zhì)量?我們對(duì)每一次檢測(cè)都設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線,并設(shè)定內(nèi)參進(jìn)行校正。我們會(huì)定期做儀器校正,檢測(cè)精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。Cathepsin DLabEx 藥物篩選平臺(tái):激酶抑制劑篩選,免疫檢查點(diǎn),GPCR,抗體藥研發(fā),蛋白互作。

流式多因子檢測(cè)技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個(gè)基于流式細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測(cè)方法,它能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。CBA是種結(jié)合流式細(xì)胞儀熒光檢測(cè)和微球免疫分析的應(yīng)用技術(shù),可以輕松的在短時(shí)間內(nèi),同時(shí)檢測(cè)多種蛋白,其作用原理利用熒光強(qiáng)度不同的微球,上面帶有可以辨認(rèn)特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等)及PE檢測(cè)抗體(detectionantibody)作用后,以流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,根據(jù)PE熒光強(qiáng)度的不同用FCAPArray軟件進(jìn)行分析和標(biāo)準(zhǔn)品做比對(duì)后,可進(jìn)行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點(diǎn):每次檢測(cè)需25-50ul樣本;靈敏度可達(dá)0.274pg/ml時(shí)間t夬速,需3-4小時(shí),快速上樣可同時(shí)測(cè)定30種蛋白,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析

酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(Elispot)特點(diǎn):酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),能夠在單細(xì)胞水平檢測(cè)細(xì)胞因子的分泌情況。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在96孔培養(yǎng)板上進(jìn)行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì),包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子。(由于涉及到細(xì)胞培養(yǎng)的過程,對(duì)單克隆抗體的要求要遠(yuǎn)高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點(diǎn)。)之后,在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細(xì)胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測(cè)的細(xì)胞以及抗原刺激物進(jìn)行培養(yǎng)。人房水炎癥因子檢測(cè)Luminex。

問:因子檢測(cè)技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實(shí)驗(yàn)適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計(jì)算96孔板可做多少樣本?答:標(biāo)曲16孔,預(yù)實(shí)驗(yàn)8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),是否可以分批次檢測(cè)?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個(gè)月內(nèi)用完,否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑也要在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會(huì)造成浪費(fèi)。細(xì)胞因子檢測(cè)是一個(gè)強(qiáng)大的工具,通過定制識(shí)別產(chǎn)生積極反應(yīng)的細(xì)胞因子的獨(dú)特組合。L-Selectin

LabEx 提供人、小鼠、大鼠:炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、信號(hào)通路重要指標(biāo)多因子組合檢測(cè)。BCA-1

腫塊物(瘤類)發(fā)病機(jī)制中的細(xì)胞因子(內(nèi)源性及相關(guān)功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學(xué)誘導(dǎo)的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學(xué)致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進(jìn)自然殺傷T細(xì)胞白血病IFN-γ:抑制化學(xué)致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進(jìn)乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學(xué)誘發(fā)的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結(jié)腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發(fā)生BCA-1

上海樂備實(shí)生物技術(shù)有限公司是一家有著雄厚實(shí)力背景、信譽(yù)可靠、勵(lì)精圖治、展望未來、有夢(mèng)想有目標(biāo),有組織有體系的公司,堅(jiān)持于帶領(lǐng)員工在未來的道路上大放光明,攜手共畫藍(lán)圖,在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康行業(yè)中積累了大批忠誠(chéng)的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),也希望未來公司能成為*****,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將**上海樂備實(shí)生物供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,共創(chuàng)佳績(jī),一直以來,公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠(chéng)實(shí)守信的方針,員工精誠(chéng)努力,協(xié)同奮取,以品質(zhì)、服務(wù)來贏得市場(chǎng),我們一直在路上!

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