腫塊物(瘤類)發(fā)病機制中的細胞因子(內源性及相關功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進自然殺傷T細胞白血病IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學誘發(fā)的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發(fā)生LabEx 藥物篩選平臺:激酶抑制劑篩選,免疫檢查點,GPCR,抗體藥研發(fā),蛋白互作。msd化學發(fā)光價格
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)優(yōu)勢:靈敏度高該測定法的靈敏度來自作為報告基團的酶。眾所周知,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現(xiàn)了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。特異性強其特異性來自抗體或抗原的選擇性。抗原抗體的結合實質上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由千兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系,所以抗原抗體反應具有高度的特異性。halo熒光分析LabEx多因子檢測作為高效的檢測手段,被廣泛應用在多種疾病研究中。
多重熒光免疫組化技術優(yōu)勢1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔心抗體交叉反應,以及一抗二抗種屬匹配問題,減少了實驗設計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。2.TSA技術可以用于檢測用傳統(tǒng)方法無法檢出的低豐度靶標。基于酪酰胺的信號放大技術能夠提供極強的敏感度、檢測極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量,節(jié)約抗體,實測確實可以提升抗體的稀釋比例。3.熒光法多重免疫組化,可同時進行五個顏色通道以上,這種情況下發(fā)射光譜會重疊,我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來解決這個問題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實反映關鍵蛋白的表達情況和相互之間的關系,從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。
多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結合。然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。LabEx多因子檢測技術應用。
抗體芯片技術服務包括:1.樣品蛋白質抽提:a.實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實驗對象為血清,則直接進入步驟3。2.蛋白質定量:按蛋白質定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。3.細胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(若標本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。b.加入標記好的抗體室溫孵育1小時。4.抗體芯片檢測5.提供實驗報告:包括詳細的實驗方法和芯片實驗結果的各種圖表和數據比較。您只需提供保存完好的標本(血清、組織或細胞、細胞上清或其他非常規(guī)液質生物樣本),本公司專業(yè)的技術服務人員就可替您完成實驗操作與數據分析。LabEx提供抗體芯片技術(Antibody Array)服務!多重熒光免疫組化的染色
LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技術服務!msd化學發(fā)光價格
找到信號通路的關鍵節(jié)點是復雜且耗時耗力的,抗體芯片試劑盒可以在一個實驗室里監(jiān)測信號通路中眾多關鍵信號組分的變化,為您節(jié)省寶貴的時間和試劑!每個試劑盒有2張玻片,每張玻片上有8或16張墊片,可同時檢測達32個樣本,這樣可使研究者在一次實驗里有充分的自由度來檢測多種濃度,細胞系或時間節(jié)點的樣本!抗體芯片基于夾心法ELISA原理進行設計,將眾多信號通路關鍵節(jié)點蛋白的捕獲抗體布于樣品孔內做成抗體點陣,隨后加入相應的識別抗體混合物,再利用兩種不同的顯色方式呈現(xiàn)結果,即化學發(fā)光法和熒光法檢測!msd化學發(fā)光價格
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