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流式細胞儀細胞凋亡分析

來源: 發布時間:2022-10-14

Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯到不同熒光標記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時,一束激光照射磁珠上的熒光,識別磁珠標記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測哪種細胞因子,從而實現“定性”作用。進一步,通過加入生物素標記的高親和配對檢測抗體,同步識別磁珠抓取的目標細胞因子,形成“三明治”結構,并加入SA-PE偶聯上生物素,通過另一束激光照射進行信號放大檢測,實現“定量”作用。細胞因子的檢測常常被用作各項疾病中預測免疫反應強度的生物標志物。流式細胞儀細胞凋亡分析

Q:樣本保存要求和保存時間?A:保存要求:<-20℃保存,-80℃保存更佳,避免反復凍融,凍融超過兩次的樣本不可使用。保存時間:越短越好,不超過3個月為佳Q:什么樣的樣本會比較容易測出?A:根據我們統計的數據來看,并沒有這樣的說法,需要做實驗才可以確認,并且每個客戶的樣本模型都是不一樣的,并沒有參考性Q:裂解液有什么要求?A:不含SDS和NP40等離子去垢劑成分的裂解液,比較建議愛必信產品(abs47047636)Q:樣本量需求?A:可登陸試劑盒官方網站查詢,一般在試劑盒詳情頁面中都有,或直接查看說明書。通常用量在50-200ul。實驗室打包服務為100ul/孔IL-2Ra elisa kit檢測服務樣本兼容度高:可兼容血清/血漿、細胞上清、細胞/組織裂解液、腦脊液等多種生物學體液。

免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。

MSD超敏電化學發光技術優勢:1)更高靈敏度與更寬的線性范圍MSD靈敏度可達0.05pg/ml,有效線性范圍達6log(從亞皮克級到幾萬皮克),能同時兼顧高低豐度蛋白的檢測。2)樣本兼容度高,基質效應小MSD平臺由于其獨特的電化學發光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質的影響更小(如粘稠樣本,懸濁顆粒樣本等),因此對于各類生物學樣本的兼容度高。目前測定樣本包括但不限于:血清,血漿,培養上清,細胞/組織裂解液,腦脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物學樣本。3)節省樣本用量,可實現多重檢測傳統ELISA每孔所需樣本量一般為50-100uloMSD通過點陣技術,為珍稀樣本的研究提供了更多的數據。4)實驗流程簡便、快速、多元化MSD提供了更為便捷快速的實驗流程,通常只需4-5小時5)信號穩定且不受顯色順序影響MSD由于基于電化學發光原理,信號分子需在電激發的情況下才能產生信號,因此整個實驗流程無需避光,每孔激發與信號采集時長統一,避免了像ELISA底物與終止液加入順序先后所導致的數據差異,不受操作人員技術水平差異的影響。LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長因子等高通量高靈敏檢測。

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液相懸浮芯片技術產品多因子技術可同時檢測多個樣本的多個指標,如通路中多個相關蛋白的共檢測。雖然液相蛋白定量檢測的技術很多,但是大多數的技術能對樣本進行單一指標的檢測,同時檢測多個指標時則需要提供大量的樣本分批檢測,操作繁瑣,且各指標間差異性較大。對于樣本量較少或需要對比各指標的用戶,傳統的技術無法滿足需要。日常實驗中,常需對溶液體系中的可溶性蛋白進行定量檢測,如細胞培養上清或血清中的細胞因子含量的定量分析,由于這些因子的含量較少,低于一般常規方法的檢測下限,使用常規的蛋白檢測方法如WesternBlot等很難檢測。而多因子技術樣本需求量少(25~60μL/孔),檢測指標多,可兼容血清/血漿,細胞上清,細胞/組織裂解液,腦脊液等多種生物學體液。其靈敏度高(部分panel可達到亞fg/ml),寬線性范圍(達到6個log),具有高重復性(板內CV<6-8%,板間<10%,批間<15%),適宜多類型指標的同時測定(炎癥,趨化,代謝……)。流式細胞儀細胞凋亡分析

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