免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。人房水炎癥因子檢測Luminex。流式熒光液態芯片技術
LabEx繼承優寧維的向正·向善·向上的價值觀,秉承“服務加速研究- Speed Up Research”之企業愿景,努力為廣大客戶提供專業、安全的一站式檢測服務,成為你科研的得力助手! LabEx公司提供流式檢測和數據分析(12色),細胞磁珠分選,單/多因子檢測,病理平臺(多重免疫組化、病理切片掃描和數據分析平臺), 藥物篩選( HTRF激酶活性檢測)等平臺定制服務。包含炎癥反應、免疫調節、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測,可提供細胞因子篩選拼板項目,每張芯片可檢測80例樣本,參與拼板的項目10例起拼,拼板成功立即啟動實驗,兩周內即出報告!cba檢測多因子LabEx多因子檢測技術應用。
基于流式平臺CBA:CBA(CytometricBeadArray),即微量樣本多指標流式蛋白定量技術是一個基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。CBA的原理通過利用一系列帶有熒光標記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統中的待測物,通過對應各種不同檢測物的特異微球上所帶有熒光強度不同從而同時測定分析樣本中多種可溶性成分的數量。CBA的特點:1.能夠同時對單個樣本進行多種檢測。2.較傳統檢測節省樣本量9倍。3.靈敏度高、重復性好。4.所有分析只需一組標準曲線。5.避免酶聯反應所致人工假象。6.節省操作和檢測時間。
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫組化/免疫熒光)實驗服務,提供樣本細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片;或組織、蠟塊均可。一抗(可幫忙提供,費用另計)。LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術。
MSD經典10因子推薦:中檢院《CAR-T細胞醫治產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到,使用MSD技術檢測CAR-T細胞醫治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術-電化學發光和點陣技術MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學發光免疫分析)技術是基于ELISA基本原理的升級,在板底通電從而激發標記物SULFO-TAG發光并由CCDCamera進行信號采集;MSDECL技術提高免疫分析的靈敏度,延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術,在96孔石墨電極板里可實現10個指標每孔的檢測,同時實現多個指標定量。MSD技術獨具一格的“六合一”特點:亞fg/ml靈敏度,低背景,多靶點檢測,6個數量級線性范圍,適用于不同樣本基質(血清/血漿,細胞培養上清,腦脊液,尿液,組織勻漿,細胞裂解液)(人/猴子/小鼠/大鼠),5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠:炎癥反應、免疫調節、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供;檢測我們來做,助您的時間更有價值!流式細胞術(flow cytometry,FCM)是一項新型的、發展迅速的生物醫學分析技術。蛋白質芯片可以進行抗原抗體篩選
LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長因子等高通量高靈敏檢測。流式熒光液態芯片技術
問:因子檢測技術有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數量,比較好是4的倍數,否則會造成浪費。流式熒光液態芯片技術
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