產生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。多因子技術可同時檢測多個樣本的多個指標,如通路中多個相關蛋白的共檢測。GranzymeB檢測服務
LabEx提供抗體芯片技術服務,您只需提供保存完好的標本(組織、細胞培養上清、血清、血漿),本公司的芯片技術服務人員就可替您完成實驗操作與數據分析,向您提供由您所選的任何一種芯片的實驗結果,可以為您節省大量的時間與精力。蛋白芯片技術特點:作為一種快速、靈敏而又經濟的工具,蛋白芯片能同時檢測單個樣品中多種分析物的相對水平。蛋白芯片的使用不需要任何特殊的儀器,也取代了多次免疫沉淀/Westernblot實驗。每個芯片在設計時都利用了精心挑選的捕獲抗體,它們在硝酸纖維素膜上重復點樣兩次。經多項研究證實,蛋白芯片能簡化鑒定蛋白所需的篩選過程。蛋白芯片高通量定性分析試劑盒比WB的靈敏度高100倍;更有大規模多分子高通量篩選作用,通過監控蛋白水平和一些蛋白翻譯后修飾的變化,能迅速靶定目標分子,以便進一步的研究。IL-33檢測服務LabEx提供 MSD---電化學發光技術。
問:因子檢測技術有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數量,建議是4的倍數,否則會造成浪費。
腫塊物(瘤類)發病機制中的細胞因子(內源性及相關功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進自然殺傷T細胞白血病IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學誘發的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發生LabEx多因子檢測技術--液相懸浮技術。
抗體芯片介紹:ELISA原理的高通量WB,單一樣品多種分析物的檢測。具有微型化、集成化、高通量的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉導、蛋白組學、腫塊物及其他疾病的相關研究。R&D的多因子固相抗體芯片?每個試劑盒可檢測4個樣本,每個樣本可同時檢測多達119個分析物,實驗可在一日內完成?每個試劑盒提供4張膜,膜上監測點以復孔的形式包被捕獲抗體和對照抗體?該即用型試劑盒包含抗體膜,檢測抗體和緩沖液等所有組分優勢和特點?使用方便,節省時間和成本?無需專門設備?高通量:1天所得到的數據相當于免疫印跡幾周所得數據?樣本類型多樣化?每種試劑盒均驗證過多種樣本,如細胞裂解液,組織裂解液,細胞培養上清,血清,血漿,唾液,尿液或牛奶等?節省樣本?獲取相同數據點所需樣本量遠低于WB?比競爭對手抗體芯片所需樣本量更少,獲得的數據更多LabEx提供28種抗體芯片,用于人,小鼠和大鼠物種的蛋白檢測相關服務,我們為您提供完整的實驗結果報告,包括數據分析結果,原始數據文件,實驗protocol等。LabEx多因子檢測技術應用。超敏多因子電化學發光MSD
MSD平臺由于其獨特的電化學發光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質的影響更小。GranzymeB檢測服務
高通量蛋白組學(Olink)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術平臺,用心服務,現有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業的實驗室技術平臺,助推科研進步!產品特點:采用獨有的PEA,ProximityExtensionAssay,鄰位延伸分析技術檢測蛋白標志物。帶有特有的核苷酸序列探針的一對抗體與被檢測蛋白特異性結合后,正確且鄰位探針通過末端5bp配對堿基互補結合,在延伸酶的作用下形成雙鏈模板,利用qPCR或NGS進行檢測,通過特異性的核苷酸序列信號來反應檢測蛋白質的含量。GranzymeB檢測服務
上海樂備實生物技術有限公司是一家有著先進的發展理念,先進的管理經驗,在發展過程中不斷完善自己,要求自己,不斷創新,時刻準備著迎接更多挑戰的活力公司,在上海市等地區的醫藥健康中匯聚了大量的人脈以及**,在業界也收獲了很多良好的評價,這些都源自于自身不努力和大家共同進步的結果,這些評價對我們而言是比較好的前進動力,也促使我們在以后的道路上保持奮發圖強、一往無前的進取創新精神,努力把公司發展戰略推向一個新高度,在全體員工共同努力之下,全力拼搏將共同上海樂備實生物供應和您一起攜手走向更好的未來,創造更有價值的產品,我們將以更好的狀態,更認真的態度,更飽滿的精力去創造,去拼搏,去努力,讓我們一起更好更快的成長!