Luminex液相芯片檢測實驗技術服務原理：Luminex：應用微球和流式細胞儀的原理，微球內部含有三種免疫熒光，通過熒光不同的比例可以區分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此，利用微球技術，可以同時檢測高達500個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體，不同的微球在一定程度上可以自由組合，這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量，節省成本和測定時間，并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。目前，Luminex試劑盒已經可以檢測500多種蛋白質分子，包括細胞因子、自身抗體、腫塊物標志物等。細胞因子檢測是一個強大的工具，通過定制識別產生積極反應的細胞因子的獨特組合。肥胖因子

酶聯免疫斑點技術（Elispot）技術優勢(1)單細胞水平，活細胞功能檢測：彌補了體液中CK半衰期短的不足，當體液中某CK含量較低時,用ELISPOT法檢測具有較高靈敏性。(2)操作簡便經濟，可以進行高通量篩選：既可檢測自發分泌細胞，又可檢測抗原特異性CK分泌細胞，具有較高特異性，并可觀察藥物治療反應，且使對CSF中T、B細胞研究成為可能，對神經免疫疾病發病機制研究及臨床療效觀察均有重要價值。(3)靈敏度高：在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。靈敏度比傳統ELISA方法高2-3個數量級。CD40 LigandLabEx提供PCR芯片(PCR Array)技術服務！

LUMINEX常見問題及解答（一）1)LUMINEX應用于哪些領域?生物醫學研究，生物標記物開發，臨床檢測等領域。Luminex技術主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何？靈敏度取決于開頭的質量。對于同樣的抗體對，Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的？血清、血漿是常用的樣本，每次檢測需要10ul，每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術檢測，制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息？檢測蛋白和基因的數目主要取決于試劑盒。蛋白質檢測目前可以達到50個左右，基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結果的特異性？檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司，產品經過了嚴格的質量控制。同時，我們檢測公司也有近15年的經驗、嚴格的操作程序和質量控制體系。

產生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；4)、非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果；5)、DAB孵育時間過長或濃度過高；6)、PBS沖洗不充分，殘留抗體結果增強著色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要；7)、標本染色過程中經常出現干片，這容易增強非特異性著色。LabEx提供液態流式技術(Luminex)服務！

MSD經典10因子推薦：中檢院《CAR-T細胞醫治產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》中提到，使用MSD技術檢測CAR-T細胞醫治后樣本中細胞因子表達來評估藥物的安全性和有效性。MSD技術－電化學發光和點陣技術MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的電化學發光免疫分析）技術是基于ELISA基本原理的升級，在板底通電從而激發標記物SULFO-TAG發光并由CCDCamera進行信號采集；MSDECL技術提高免疫分析的靈敏度，延伸了線性范圍。MSD通過點陣技術，在96孔石墨電極板里可實現10個指標每孔的檢測，同時實現多個指標定量。MSD技術獨具一格的“六合一”特點：亞fg/ml靈敏度，低背景，多靶點檢測，6個數量級線性范圍，適用于不同樣本基質（血清／血漿，細胞培養上清，腦脊液，尿液，組織勻漿，細胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）,5-25ul微量樣本檢測。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎癥反應、免疫調節、TH1/TH2通路重要指標多因子組合檢測限。試劑我們提供；檢測我們來做，助您的時間更有價值！LabEx抗體芯片主要用于蛋白表達譜、蛋白質磷酸化及蛋白質相互作用等檢測。自體生長因子

LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗體芯片在內的多因子檢測服務。肥胖因子

酶聯免疫斑點技術（Elispot）特點：酶聯免疫斑點技術Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(ELISA)，能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設計在96孔培養板上進行，直接以培養板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質，包被上特異性的單克隆抗體，用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養的過程，對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體，該抗體需要無毒，親和力高等特點。)之后，在培養板的孔內加入細胞培養基(現在無血清ELISPOT技術已經成熟，培養基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養。肥胖因子

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