Luminex液相芯片檢測實驗技術(shù)服務(wù)原理:Luminex:應(yīng)用微球和流式細胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時檢測高達500個蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時間,并且使多種目標分子之間相關(guān)性的分析更加準確。目前,Luminex試劑盒已經(jīng)可以檢測500多種蛋白質(zhì)分子,包括細胞因子、自身抗體、腫塊物標志物等。本panel可檢測以下因子:B2M,Calbindin,Cystatin C,NGAL 種屬:Rat。磁珠分選細胞緩沖液
免疫組化技術(shù)是用標記物標記的抗體與組織或細胞的抗原(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、***、病原體以及受體等)反應(yīng),結(jié)合形態(tài)學(xué)檢查,對抗原作定性、定量、定位檢測的技術(shù)。目前通常選用免疫酶組化間接染色法進行實驗,利用該技術(shù)可進行細胞、亞細胞水平的檢測。**近幾年,分子生物學(xué)研究異常活躍,但**終還要歸到形態(tài)上來。用免疫組織化學(xué)方法對所研究的大分子進行定位,進而深入研究其功能。分類:免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等特點:具有特異性強、靈敏度高及能將形態(tài)研究與功能、代謝研究有機地結(jié)合在一起實驗標本:實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。抗體:免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體多因子檢測授權(quán)商本panel可檢測以下因子:ARG1,GOT1,GSTα,SDH,5'-NT/CD73 種屬:Rat。
產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當(dāng)增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。
LabEx可提供的服務(wù)及優(yōu)勢(一)LabEx服務(wù)的優(yōu)勢:1、專業(yè)的抗體公司;2、先進的實驗儀器平臺;3、可靠、放心的結(jié)果;4、實惠、親民的價格;5、認真、嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。ELISA:將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點。流式檢測服務(wù):流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置,它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量。并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。抗體芯片:具有微型化、集成化、高通量的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關(guān)蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白組學(xué)、腫塊物及其他疾病的相關(guān)研究。本panel可檢測以下因子:EMMPRIN/CD147,MMP-1,MMP-2,MMP-3,MMP-7,MMP-8,MMP-9,MMP-12,MMP-13 種屬:Human。
LUMINEX常見問題及解答(二)6)客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測?Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗。但是,需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標的檢測?可以用于基因表達,基因多態(tài)性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達水平差異有無意義?表達差異主要取決于標本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務(wù)。9)LUMINEX實驗和流式細胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù),檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內(nèi)的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。MSD平臺由于其獨特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小。流式細胞學(xué)
本panel可檢測以下因子:TGF-β1,TGF-β2,TGF-β3 種屬:Mouse。磁珠分選細胞緩沖液
酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)特點:酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設(shè)計在96孔培養(yǎng)板上進行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì),包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。磁珠分選細胞緩沖液
上海樂備實生物技術(shù)有限公司是一家從事生物科技、生物制品、醫(yī)藥科技領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),檢驗技術(shù)的研發(fā),從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務(wù),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)、實驗室耗材與設(shè)備的銷售。 【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實、誠實可信的企業(yè)。公司自創(chuàng)立以來,投身于標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù),是醫(yī)藥健康的主力軍。樂備實生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。樂備實生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使樂備實生物在行業(yè)的從容而自信。