液態流式技術(Luminex)流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等，是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為中心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體，多指標并行分析，可一管同時準確定量檢測2-100種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點；可用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體、配體識別分析等多方面、多領域的研究。基本原理：應用微球和流式細胞儀的原理，微球內部含有三種免疫熒光，通過熒光不同的比例可以區分100種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此，利用微球技術，可以同時檢測高達100個蛋白或基因。Luminex技術的測量結果在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平。Luminex應用的熒光編碼微球帶有針對不同目標分子的特異性抗體，不同的微球在一定程度上可以自由組合，這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標分子的分析。多目標分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節省成本和測定時間，并且使多種目標分子之間相關性的分析更加準確。細胞因子的檢測常常被用作各項疾病中預測免疫反應強度的生物標志物。msd超敏化學發光檢測

抗體芯片介紹:ELISA原理的高通量WB，單一樣品多種分析物的檢測。具有微型化、集成化、高通量的特點，可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關蛋白的表達豐度，目前主要用于信號轉導、蛋白組學、腫塊物及其他疾病的相關研究。R&D的多因子固相抗體芯片?每個試劑盒可檢測4個樣本，每個樣本可同時檢測多達119個分析物，實驗可在一日內完成?每個試劑盒提供4張膜，膜上監測點以復孔的形式包被捕獲抗體和對照抗體?該即用型試劑盒包含抗體膜，檢測抗體和緩沖液等所有組分優勢和特點?使用方便，節省時間和成本?無需專門設備?高通量：1天所得到的數據相當于免疫印跡幾周所得數據?樣本類型多樣化?每種試劑盒均驗證過多種樣本，如細胞裂解液，組織裂解液，細胞培養上清，血清，血漿，唾液，尿液或牛奶等?節省樣本?獲取相同數據點所需樣本量遠低于WB?比競爭對手抗體芯片所需樣本量更少，獲得的數據更多LabEx提供28種抗體芯片，用于人，小鼠和大鼠物種的蛋白檢測相關服務,我們為您提供完整的實驗結果報告，包括數據分析結果，原始數據文件，實驗protocol等。Sengenics ImmunomeTM檢測服務LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等經典信號通路研究。

免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些？1)、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產的工作液，怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結果？另外，不是抗體濃度越高就越易出現陽性結果，抗原抗體反應有前帶和后帶效應，必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全，對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位，以利于與抗體結合；建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗，這是比較好的時間和次數。若不行，還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低；4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全，抗體未能充分進入胞內參與反應。7)、開始做免疫組化，我建議你一定要首先做個陽性對照片，排除抗體等外的方法問題。

酶聯免疫斑點技術（Elispot）LabEx始終致力于為您的研究需要，提供前沿的多因子技術平臺，用心服務，現有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業的實驗室技術平臺，助推科研進步！隨著酶免疫分析技術在醫學及生物學領域的較廣的應用，使體外檢測各種細胞因子和抗體研究有了新的突破。在研究免疫應答機制時，以往人們常用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測體液中游離的細胞因子(CK)或抗體，但由于游離的循環抗體或CK半衰期不同，使之在體液中不斷地被代謝，而不能確切地反應體內抗體及CK水平。80年代中期等根據ELISA技術的基本原理，建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯免疫斑點(ELISPOT)技術，因其具有較高的特異性和敏感性，目前正被國內外較廣的應用，對探索自身免疫系統疾病發病機制具有重要意義。LabEx 提供人、小鼠、大鼠：炎癥反應、免疫調節、信號通路重要指標多因子組合檢測。

LUMINEX常見問題及解答（一）1)LUMINEX應用于哪些領域?生物醫學研究，生物標記物開發，臨床檢測等領域。Luminex技術主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何？靈敏度取決于開頭的質量。對于同樣的抗體對，Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的？血清、血漿是常用的樣本，每次檢測需要10ul，每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術檢測，制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息？檢測蛋白和基因的數目主要取決于試劑盒。蛋白質檢測目前可以達到50個左右，基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結果的特異性？檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司，產品經過了嚴格的質量控制。同時，我們檢測公司也有近15年的經驗、嚴格的操作程序和質量控制體系。PCR Array：用于檢測生物學功能相關的一系列基因的表達量變化，發現變化比較明顯的標志性基因。msd 多因子檢測服務

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多重熒光免疫組化，主要的技術原理來自TSA技術，TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification)，是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。簡單來說，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯熒光素），來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯，使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后微波處理，前一輪非共價結合的抗體被洗掉，共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。等到所有抗體孵育結束，熒光素都結合好后，然后去檢測結果。msd超敏化學發光檢測

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