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來源: 發布時間:2023-07-25

產生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經常出現干片,這容易增強非特異性著色。Luminex既能檢測蛋白,又能檢測核酸。halo數字病理圖像分析

Q:樣本處理方案?A:血清:不含抗凝劑的**管**,室溫靜置2小時(避免震動,防止溶血),離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存血漿:含抗凝劑(EDTA、肝素,具體采取哪種抗凝劑,參考說明書)的**管**,,離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存細胞裂解液:收集細胞,PBS清洗后,離心10min(1000g,4℃),棄去上清,加入適量裂解液(107細胞對應200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存組織裂解液:適量RIPA裂解液加入組織中(10mg對應100-200ul裂解液),組織破碎器處理組織至勻漿(冰上處理),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存細胞上清:離心,取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復凍存ARY019檢測服務為啥高分的文章用的都在做細胞因子的檢測?

酶聯免疫斑點技術(Elispot)技術優勢(1)單細胞水平,活細胞功能檢測:彌補了體液中CK半衰期短的不足,當體液中某CK含量較低時,用ELISPOT法檢測具有較高靈敏性。(2)操作簡便經濟,可以進行高通量篩選:既可檢測自發分泌細胞,又可檢測抗原特異性CK分泌細胞,具有較高特異性,并可觀察藥物治療反應,且使對CSF中T、B細胞研究成為可能,對神經免疫疾病發病機制研究及臨床療效觀察均有重要價值。(3)靈敏度高:在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。靈敏度比傳統ELISA方法高2-3個數量級。

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腫塊物(瘤類)發病機制中的細胞因子(內源性及相關功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進自然殺傷T細胞白血病IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學誘發的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發生多因子技術服務我們LabEx是專業!多重免疫熒光染色檢測服務

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