應用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細胞,觀察細胞形態(tài)及生長情況,流式細胞儀檢測細胞表型,并檢測細胞體外多向分化能力.結果應用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細胞可獲得乳牙牙髓干細胞,經統(tǒng)計學處理證明看其生長速度慢于牙髓細胞,細胞表型分析證實CD29,CD105高表達,CD34,CD45低表達.礦化誘導和成脂誘導證實STRO-1+乳牙牙髓細胞具有干細胞多向分化的能力.結論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細胞的方法.所分離的細胞具有干細胞的表型特點及多向分化能力.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。北京蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商

免疫磁珠分離羊水來源OCT-4陽性胎兒干細胞的可行性.方法 采用免疫磁珠細胞分選法去除羊水細胞中CD44和SSEA4陽性細胞,使OCT-4陽性胎兒干細胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴增后,觀察細胞生長特性,免疫熒光染色計算OCT-4陽性胎兒干細胞得率,Real-TimePCR比較分離前后OCT-4表達量的差異,免疫組化檢測NANOG,AKP,MAP-2,NGFR和Myosin等細胞因子的表達.結果 經免疫磁珠分離的細胞接種12h內貼壁生長,形態(tài)呈梭形,部分呈多角形,融合后形成輻射狀排列.免疫熒光染色OCT-4陽性細胞得率為(90.15±8.25)%,Real-TimePCR檢測結果顯示分離后細胞OCT-4的表達量較未分離細胞和MSC有***性差異(P<0.01).原代培養(yǎng)可獲得(1～2)×107個細胞,3代可獲得(2～4)×108個細胞,傳至10代以后細胞的增殖能力下降.免疫組化結果顯示OCT-4陽性胎兒干細胞表達NANOG,AKP,MAP-2和NGFR等細胞因子.結論 免疫磁珠細胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽性的胎兒干細胞,分離后的細胞保持干細胞原有特性及生物學特征,可作為組織工程種子細胞.湖北anti-Flag COIP免疫磁珠批量定制免疫磁珠法分離純化人腎CancerCD133~+細胞實驗研究。

免疫磁珠法原代分離純化大鼠視網膜微血管周細胞,并確定其免疫組化特征.方法免疫磁珠法結合傳統(tǒng)的膠原酶消化及篩網過濾法分離出大鼠視網膜微血管周細胞,采用含有20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng).通過周細胞的形態(tài)和生長方式初步鑒別,再進行細胞α-SMA,vWF,GFAP抗體免疫組織化學特征鑒定,及激光共聚焦顯微鏡行周細胞PDGFR-β和desmin抗體熒光雙標觀察.周細胞生長曲線通過MTT法測定.結果本法獲得的周細胞純度可達98%,并能連續(xù)傳代.原代周細胞約2～3周融合,傳代后生長和融合速度加快,細胞形態(tài)不規(guī)則,胞內可見絲狀結構,無接觸性抑制.免疫組化證實周細胞胞漿內α-SMA蛋白表達陽性,內皮細胞特異性vWF因子表達陰性,膠質細胞特異性GFAP表達陰性.激光共聚焦顯示周細胞PDGFR-β和desmin抗原表達均為陽性.結論本研究***報道應用免疫磁珠法分離培養(yǎng)大鼠視網膜微血管周細胞.獲得高度純化的周細胞具有明確的免疫組化特征,可用于相關視網膜血管性疾病的進一步研究.

常見問題及對策

3： 如何避免磁珠在儲存或使用過程中可能出現(xiàn)的聚集情況？

磁珠應保存在2～8℃，使用時應避免由于污染而導致的不可逆聚 集，或因干燥而導致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬 于正?，F(xiàn)象，不影響磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑（如NP-40、 Tween-20 或 Triton X-100）可有效防止磁珠聚集。經過低pH洗脫操 作的磁珠可以用結合緩沖液洗滌至中性，然后用含有0.1% (v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠，并用超聲波水浴 處理2min，即可使磁珠恢復均勻狀態(tài)，以上處理均不影響磁珠的抗體 結合效率。

4： 如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象？

建議使用低吸附率的耗材進行磁珠操作。另外，在緩沖液中添加 0.01%～0.1%(v/v)的非離子型去垢劑（如NP-40、Tween-20或 Triton X-100）可以有效降低磁珠對耗材的粘附。

人骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨間充質祖細胞的免疫磁珠分選和鑒定。

利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經分離培養(yǎng)獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側坐骨神經,解剖鏡下剝離去除神經外膜,獲得神經束,將神經束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養(yǎng)液培養(yǎng).7d后應用免疫磁珠法對細胞進行純化培養(yǎng),培養(yǎng)2d后進行傳代接種.培養(yǎng)過程中對細胞進行形態(tài)學觀察,計數(shù)及活力測定;MTY法繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞化學熒光染色對細胞進行鑒定并且計算所得細胞純度.[結果]分離培養(yǎng)所得細胞即為雪旺細胞;采用免疫磁珠法能對培養(yǎng)所得雪旺細胞進行純化.純化后雪旺細胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養(yǎng)2d后就可以傳代.[結論]免疫磁珠法可以用于雪旺細胞的純化培養(yǎng),所得雪旺細胞純度高,活力強,能滿足組織工程人工神經的需要.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。北京蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商

利用BEENBIO免疫磁珠技術檢測大腸*細胞。北京蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商

戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質量鑒定結果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.北京蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商

上海普平生物科技有限公司致力于化工，是一家招商型的公司。公司自成立以來，以質量為發(fā)展，讓匠心彌散在每個細節(jié)，公司旗下科研試劑、耗材、儀器，納米脂質體，細胞、分子、蛋白實驗，科研項目深受客戶的喜愛。公司注重以質量為中心，以服務為理念，秉持誠信為本的理念，打造化工良好品牌。普平生物秉承“客戶為尊、服務為榮、創(chuàng)意為先、技術為實”的經營理念，全力打造公司的重點競爭力。