建立免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜牛長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.應用免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1陽性細胞。浙江COIP免疫磁珠哪家好
磁珠分離細胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達,進一步了解DPSC的表型特點及與EMSC的相關性,為今后研究提供較為純化的細胞來源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標法檢測抗原HNK-1、Nestin的表達。結果磁珠分離前后進行細胞計數,大約有5%的DPSC為STRO-1+的細胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測同時表達HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測顯示也同時表達HNK-1(++)、Nestin(++)。結論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽性的DPSC共表達EMSC的標記HNK-1和Nestin,進一步說明二者作為間充質來源的干細胞,細胞表型具有繼承性。吉林anti-Flag COIP免疫磁珠生產廠家免疫磁珠技術檢測外周血中卵巢Cancer細胞。
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在agarosebeads上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內結合的蛋白質B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離，對B蛋白進行檢測，進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的，符合體內實際情況，得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。
羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數量和特性.結果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%～3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養9～14d,CD34+細胞在液體培養中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養,可產生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
分離轉基因小鼠骨髓造血干細胞.運用針對小鼠干細胞表面特異表達的干細胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細胞,用流式細胞術(FACS)檢測MACS分離后骨髓細胞中干細胞(Sca-1陽性細胞)比例,監測細胞分選效果.結果顯示MACS分離后骨髓細胞中Sca-1陽性細胞所占比例達85%以上,涂片觀察發現細胞組成和細胞形態學特征與FACS所得結果一致.MACS可以從轉基因小鼠全骨髓細胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細胞,細胞純度可達85%以上.BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。上海anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門
免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。浙江COIP免疫磁珠哪家好
免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結合10 min達到平衡,其比較大結合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.浙江COIP免疫磁珠哪家好
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