免疫共沉淀（COIP）優點

（1）相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的，處于天然狀態；

（2）蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的，可以避免人為的影響；

（3）可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。

免疫共沉淀（COIP）缺點

（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質－蛋白質相互作用；

（2）兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

（3）必須在實驗前預測目的蛋白是什么，以選擇***檢測的抗體，所以，若預測不正確，實驗就得不到結果，方法本身具有冒險性。

（4）靈敏度沒有親和色譜高。 BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。上海anti-Myc COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

COIP常見問題及對策

1：如何提高抗體與磁珠結合效率?

磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關，請確 認抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間（ 30～120min）、提高結合緩沖液的pH值（8～9）及降低離子強度（ 25～100mM NaCl）等方法提高親和效率。

2：如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?

可以先將抗體與樣品進行孵育，形成抗體-抗原復合物，再用 Protein A/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效 率，并降低磁珠與樣品接觸的時間，從而提高沉淀產物的特異性。對 于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。 浙江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠性能BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠蛋白相互作用。

免疫磁珠分選CD34+細胞及臍血中CD34+細胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細胞后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細胞,流式細胞儀檢測分選前后CD34細胞的純度.[結果]分選前MNC中CD34+細胞純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細胞純度達到(91.55士4.11)%.[結論]臍血作為CD347造血干/祖細胞的來源以及免疫磁珠方法在獲得高純度CD34+細胞中有重要的意義.

免疫磁珠分選CD34+細胞及臍血中CD34+細胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細胞 后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細胞,流式細胞儀檢測分選前后CD34細胞的純度.[結果]分選前MNC中CD34+細胞 純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細胞純度達到(91.55士4.11)%.[結論]臍血作為CD347造血干/祖細胞的來源以及免疫磁 珠方法在獲得高純度CD34+細胞中有重要的意義.

免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀80年代出現的技術方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應，在細胞表面形成玫瑰花結，這些結合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下，就會與其他未被結合的細胞分群，具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標記的細胞，從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術已經***運用于細胞及分子生物學，分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞，從而決定了這一方法在神經干細胞分選中應用的技術可行性。BEENbio protein A/G Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。

免疫磁性細胞分選系統分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統,通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產物中的陽性細胞數,分離細胞的總細胞數×100%,細胞回收率:分離產物中的陽性細胞數,起始標本陽性細胞總數×100%。BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。浙江protein A/G COIP免疫磁珠送貨上門

外周血微轉移前列腺Cancer細胞的免疫磁珠法檢測。上海anti-Myc COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.上海anti-Myc COIP免疫磁珠經銷商價格4折起

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