建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優化免疫磁珠法的反應條件,考察其精密度和特異性。收集經血培養確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結果進行比較。結果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內、批間變異系數(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應用價值。BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。湖北anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠供應商
COIP 磁珠緩沖液匯總
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細胞裂解液
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正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
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結合緩沖液binding buffer
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用RIPA 細胞裂解緩沖液代替
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洗滌緩沖液Washing buffer
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PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
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洗脫緩沖液Elution buffer
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直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后,收集上清液檢測。
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免疫磁珠法(MACS):免疫磁珠法是2O世紀80年代出現的技術方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選,1990年,Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應,在細胞表面形成玫瑰花結,這些結合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下,就會與其他未被結合的細胞分群,具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性,這樣就可以篩選或去除所標記的細胞,從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術已經***運用于細胞及分子生物學,分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞,從而決定了這一方法在神經干細胞分選中應用的技術可行性。
探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.CD3/CD28免疫磁珠法體外擴增外周血T淋巴細胞。
建立有效的人類神經干細胞分離純化系統和方法.方法:無菌取孕24周流產胎兒的室下區腦組織,制備細胞懸液,用磁性微珠標記的CD133單克隆抗體與細胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細胞,通過體外培養并誘導分化,觀察CD133陽性細胞和陰性細胞的增殖情況及分化能力.結果:經免疫磁珠分選的室下區腦組織中,CD133(+)細胞占胚胎腦組織細胞的2%左右,該細胞體外擴增能力強,細胞呈球形生長,并易聚集成團,培養5d,10d,15d,20d進行活細胞計數,細胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導分化后的細胞經染色鑒定可分化為神經元,神經膠質等多種神經細胞,陰性細胞擴增能力弱,活細胞計數以死細胞數量居多,大約705,另外一些細胞貼壁分化.結論:免疫磁珠法簡便,有效,經免疫磁珠分離的神經干細胞在體外能進一步培養擴增并分化.多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應用。湖南COIP免疫磁珠經銷商價格4折起
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免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養人骨髓來源多能成體祖細胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細胞,在自制培養基下貼壁培養后,將獲取的骨髓貼壁細胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負分選,錐蟲藍拒染實驗計數MACS分選前后細胞活力.流式細胞儀鑒定分選后細胞純度;流式細胞儀分析培養細胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達情況.結果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細胞純度大于98%;流式細胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達細胞比率為99.2%,CD44陽性細胞比率為98.3%,CD34陽性細胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細胞比率為5.3%.結論:CD45,GlyA免疫微磁珠負分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養基中有較強的增殖能力.湖北anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠供應商
上海普平生物科技有限公司致力于化工,以科技創新實現***管理的追求。普平生物深耕行業多年,始終以客戶的需求為向導,為客戶提供***的科研試劑、耗材、儀器,納米脂質體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目。普平生物致力于把技術上的創新展現成對用戶產品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。普平生物始終關注化工市場,以敏銳的市場洞察力,實現與客戶的成長共贏。