利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經分離培養獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側坐骨神經,解剖鏡下剝離去除神經外膜,獲得神經束,將神經束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養液培養.7d后應用免疫磁珠法對細胞進行純化培養,培養2d后進行傳代接種.培養過程中對細胞進行形態學觀察,計數及活力測定;MTY法繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞化學熒光染色對細胞進行鑒定并且計算所得細胞純度.[結果]分離培養所得細胞即為雪旺細胞;采用免疫磁珠法能對培養所得雪旺細胞進行純化.純化后雪旺細胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養2d后就可以傳代.[結論]免疫磁珠法可以用于雪旺細胞的純化培養,所得雪旺細胞純度高,活力強,能滿足組織工程人工神經的需要.空腸彎曲菌免疫磁珠富集方法的建立。江蘇anti-HA COIP免疫磁珠經銷商價格4折起
免疫磁珠細胞分選方法可以在幾分鐘內從復雜的細胞混合物中分離出很高純度的細胞。把細胞用超級順磁性的免疫磁珠特異性地標記,磁性標記完后,把這些細胞通過一個放在強而穩定磁場中的分選柱。分選柱里的基質造成一個高梯度磁場。被磁性標記的細胞滯留在柱里而未被標記的細胞則流出。當分選柱移出磁場后,滯留柱內的磁性標記細胞就可以被洗脫出來,這樣就完全可以獲得標記和未標記的兩個細胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細胞的一百萬份之一,可與病毒的大小相比。標記細胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標記物間的反應可在幾分鐘內完成。由于微型磁珠的體積極小,所以不會對細胞造成機械性壓力,而且使孵育時間短,操作過程快。免疫磁珠形成一個穩定的膠體液,它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會***細胞或影響細胞的功能和活力,細胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽性分選出的細胞(即磁性標記細胞)可立即用于分析和隨后的實驗。黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠經銷商價格4折起免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經干細胞的生物學特征。
免疫磁珠法(MACS):免疫磁珠法是2O世紀80年代出現的技術方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選,1990年,Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應,在細胞表面形成玫瑰花結,這些結合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下,就會與其他未被結合的細胞分群,具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性,這樣就可以篩選或去除所標記的細胞,從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術已經***運用于細胞及分子生物學,分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞,從而決定了這一方法在神經干細胞分選中應用的技術可行性。
兔前軟骨干細胞PSCs,(precartilagiousstemcells)的分離,培養方法及增殖,表型特征,為細胞移植***椎間盤退變,提供合適的種子細胞.[方法]取胎兔骨骺周圍軟骨膜(LaCroix環)中的細胞進行原代培養,然后采用免疫磁珠分離系統分選純化PSCs.體外培養,傳代,凍存復蘇,繪制生長曲線,觀察細胞特性.分別采用免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定純化后的PSCs.[結果]免疫磁珠分離可獲得純度較高的兔PSCs,培養后成活率高,細胞狀態良好.細胞凍存復蘇后,細胞增殖速度,細胞形態及表面標志物無明顯變化.免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定后,細胞都有明顯的PSCs表面特異性標記物的表達.[結論]PSCs存在于LaCroix環中,免疫磁珠分離法得到的PSCs,體外培養條件下,細胞增殖較快,生物學特性穩定.免疫磁珠法分離和純化胚胎神經干細胞。
免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結合10 min達到平衡,其比較大結合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.免疫磁珠富集與免疫層析一體化檢測甲型流感病毒的研究。陜西anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠市場報價
BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠蛋白相互作用。江蘇anti-HA COIP免疫磁珠經銷商價格4折起
產品價格
產品貨號
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規格
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價格
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BEENbio-PR003-0.4
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0.4 mL
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1150 RMB
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BEENbio-PR003-1
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1 mL
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1780 RMB
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BEENbio-PR003-5
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5 mL
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6825 RMB
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產品描述
BEENbio Anti HA COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結合了大量的小鼠Anti HA單克隆抗體,與傳統的Anti HA COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節省40%的時間。
產品特性
項目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀(IP),HA tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結合容量
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大于1.1 mg HA tagged protein/mL 磁珠
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儲存條件
4oC長期穩定
使用說明
磁珠的準備
重懸Anti HA 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。
樣品的結合(binding)
在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。
注意:結合過程中,磁珠可能會出現聚團或呈片狀,屬于正常現象,不會影響實驗結果。
洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。
洗脫(elution):上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進行SDS-PAGE檢測。 江蘇anti-HA COIP免疫磁珠經銷商價格4折起
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