從白血病KG1a細胞中分選CD34+CD38-干細胞并研究其生物學特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細胞,流式細胞術分析細胞表面膜抗原,細胞周期,甲基纖維素培養體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細胞為對照,甲基偶氮唑藍法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內成瘤能力.結果分選的CD34+CD38-細胞純度達95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細胞的活性差異有統計學意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細胞(P〈0.05).結論免疫磁珠法分選白血病干細胞簡單易行,分選的細胞符合白血病干細胞生物學特性.多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應用。廣東anti-Flag COIP免疫磁珠批量定制
免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133^+細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜生長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.遼寧anti-Flag COIP免疫磁珠銷售免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在agarosebeads上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內結合的蛋白質B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離,對B蛋白進行檢測,進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的,符合體內實際情況,得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。
BEENbio鏈霉親和素磁珠本產品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價偶聯而成。這種微球能用于捕獲生物素標記的底物,如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結合是***的非共價生物交互作用之一,因此,這也是親和層析法所使用的一種強大工具。生物分子可以與生物素輕松融合,而層析基質上固定的鏈霉親和素配體可以與之結合,而且這種鏈霉親和素-生物素相互作用具有較低的非特異親和性,捕獲所需的底物能夠直接應用于后續實驗。本產品可廣泛應用于免疫學檢測、核酸純化、核酸固相雜交檢測、細胞分選等分子生物學實驗。免疫磁珠技術在tumor學中的應用。河南蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
基于免疫磁珠分散聚集狀態檢測病原體與Cancer癥標志物。廣東anti-Flag COIP免疫磁珠批量定制
COIP常見問題及對策
1:如何提高抗體與磁珠結合效率?
磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關,請確 認抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低,可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間( 30~120min)、提高結合緩沖液的pH值(8~9)及降低離子強度( 25~100mM NaCl)等方法提高親和效率。
2:如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?
可以先將抗體與樣品進行孵育,形成抗體-抗原復合物,再用 Protein A/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效 率,并降低磁珠與樣品接觸的時間,從而提高沉淀產物的特異性。對 于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。 廣東anti-Flag COIP免疫磁珠批量定制
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