應用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細胞,并做培養鑒定.方法采用STRO-1為標記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細胞,觀察細胞形態及生長情況,流式細胞儀檢測細胞表型,并檢測細胞體外多向分化能力.結果應用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細胞可獲得乳牙牙髓干細胞,經統計學處理證明看其生長速度慢于牙髓細胞,細胞表型分析證實CD29,CD105高表達,CD34,CD45低表達.礦化誘導和成脂誘導證實STRO-1+乳牙牙髓細胞具有干細胞多向分化的能力.結論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細胞的方法.所分離的細胞具有干細胞的表型特點及多向分化能力.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。北京anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經50%硫酸銨粗提后,再經陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價偶聯于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結果進行比較。結果共獲得5株雜交瘤細胞株,其中1F12細胞株分泌的抗體效價、相對親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價為106,相對親和力為0.2mg/L,與FITC標記的BSA可特異性結合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結合熒光素標記的蛋白。應用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達0.1ng/ml。結論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應用于免疫檢測分析的價值。陜西蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠市場報價利用人免疫球蛋白構建免疫磁珠富集金葡菌條件優化。
COIP 磁珠緩沖液匯總
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細胞裂解液
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正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
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結合緩沖液binding buffer
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用RIPA 細胞裂解緩沖液代替
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洗滌緩沖液Washing buffer
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PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
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洗脫緩沖液Elution buffer
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直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后,收集上清液檢測。
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從臍血中分離,培養血管內皮祖細胞,研究內皮祖細胞的生長特性和誘導分化條件.方法:應用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術及形態學(光鏡,電鏡)觀察研究內皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養基中,觀察內皮祖細胞的生長特性.結果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內,培養1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結構,電鏡觀察可見胞漿內典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養14d后細胞表面抗原表達情況:與培養開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.免疫磁珠負性富集結合免疫熒光抗體技術檢測卵巢Cancer患者外周血CTCs的方法建立和應用。陜西蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠市場報價
免疫磁珠技術應用于肺Cancer中的研究進展。北京anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
核酸提取磁珠通過對磁珠進行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實現對核酸的高通量、自動化提取,這一技術產生于20世紀80年代,已經有了成熟的試劑盒并形成為產業。隨著基因檢測、個性化給藥、產前診斷等的普及,在生物行業各領域都追求高通量、自動化的***,傳統DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優勢則愈來愈明顯:①能夠實現自動化、大批量操作,已有96孔的核酸自動提取儀,用一個樣品的提取時間即可實現對96個樣品的處理,符合生物學高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發時能夠進行快速及時的應對,這一特點使得傳統方法望塵莫及;②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內完成;③安全無毒,不使用傳統方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對實驗操作人員的傷害減少到**少,完全符合現代環保理念;④磁珠與核酸的特異性結合使得提取的核酸純度高、濃度大。北京anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
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