戊二醛兩步交聯法將辣根過氧化物酶(HRP)結合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質量鑒定結果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規范化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細胞及其生物學特性鑒定。甘肅anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優化免疫磁珠法的反應條件,考察其精密度和特異性。收集經血培養確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結果進行比較。結果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內、批間變異系數(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應用價值。湖南蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細胞提取中的應用。
免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結合而沒有磁性，不在磁場中停留，從而使細胞得以分離。免疫磁珠應用分為正選法和負選法：正選法－磁珠結合的細胞就是所要分離獲得的細胞負選法－磁珠結合不需要的細胞，游離于上清液的細胞為所需細胞，一般而言，負選法比正選法的磁珠用量大磁珠：大小在0.1－0.45mm包被了生產的高質量單抗磁珠已為白細胞亞群的分選所優化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細胞懸液，磁珠特異性地與有相應抗原的細胞亞群結合，通過分離得到的連有磁珠的細胞可直接用于功能試驗和用流式細胞儀檢測。
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.BEENbio protein A/G Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。
利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細胞株PC3中分選CD133+/CD44+細胞,通過免疫組化,流式細胞術,CCK8,平板克隆形成實驗及裸鼠成瘤實驗鑒定其表面標志物表達情況及**干細胞特性.結果經免疫磁珠法分選所得CD133+/CD44+細胞比例為0.50%;免疫組化及流式顯示其CD44/CD133/整合素α2β1均高表達;其細胞增殖和克隆形成率高于PC3細胞;以低密度注射時,其裸鼠體內成瘤率明顯高于PC3細胞.結論利用免疫磁珠法可從人前列腺*細胞株PC3中高效的分選出具有**干細胞生物學特性的前列腺*類干細胞.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。安徽anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
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免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1^+陽性細胞,獲得同質性骨髓基質干細胞.方法:實驗于2004-06/2005-06在東南大學修復重建外科研究所實驗室完成.采集正常自愿獻髓者骨髓,淋巴細胞分離液體離心純化分離后利用免疫磁珠分離出STRO-1^+細胞,研究其生長曲線,體外擴增能力,集落形成能力,細胞表型,細胞周期,成骨能力.結果:①利用免疫磁珠可從成人骨髓中獲取STRO-1^+細胞.經體外培養發現STRO-1^+細胞貼壁生長,相差顯微鏡下STRO-1^+細胞呈成纖維細胞梭形外觀.②生長曲線可分為細胞生長延滯期,對數生長期及穩定期,細胞倍增時間為57h.③STRO-1^+細胞可以在體外擴增12周左右,形成的成纖維細胞集落數,處于細胞分裂期的細胞數,擴增倍數均低于傳統分離方法得到的骨髓基質干細胞.④經流式細胞儀檢測,STRO-1^+細胞穩定地表達CD29,CD44,CD105,不表達造血細胞系的表面標記CD14,CD34,CD45,HLA-DR.⑤經成骨培養發現STRO-1^+的骨髓基質干細胞具有很強的成骨分化能力.結論:利用免疫磁珠能夠從成人骨髓中快速分離,純化骨髓基質干細胞,且具有高效,靈敏。甘肅anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
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