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安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起

來源: 發布時間:2022-03-15

抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經50%硫酸銨粗提后,再經陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價偶聯于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結果進行比較。結果共獲得5株雜交瘤細胞株,其中1F12細胞株分泌的抗體效價、相對親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價為106,相對親和力為0.2mg/L,與FITC標記的BSA可特異性結合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結合熒光素標記的蛋白。應用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達0.1ng/ml。結論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應用于免疫檢測分析的價值。H9亞型禽流感病毒免疫磁珠分離方法初步建立。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起

免疫磁珠分選CD34+細胞及臍血中CD34+細胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細胞后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細胞,流式細胞儀檢測分選前后CD34細胞的純度.[結果]分選前MNC中CD34+細胞純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細胞純度達到(91.55士4.11)%.[結論]臍血作為CD347造血干/祖細胞的來源以及免疫磁珠方法在獲得高純度CD34+細胞中有重要的意義.

免疫磁珠分選CD34+細胞及臍血中CD34+細胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細胞 后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細胞,流式細胞儀檢測分選前后CD34細胞的純度.[結果]分選前MNC中CD34+細胞 純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細胞純度達到(91.55士4.11)%.[結論]臍血作為CD347造血干/祖細胞的來源以及免疫磁 珠方法在獲得高純度CD34+細胞中有重要的意義. 黑龍江protein A/G COIP免疫磁珠生產廠家BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。

免疫共沉淀(COIP)實驗過程
(1)轉染后24-48 h 可收獲細胞,加入適量細胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min, 細胞裂解液于4°C, 最大轉速離心30 min后取上清;
(2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過夜;
(3)取10μl protein A 瓊脂糖珠,用適量裂解緩沖液洗3 次,每次3,000 rpm離心3 min;
(4)將預處理過的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h,使抗體與protein A瓊脂糖珠耦聯;
(5)免疫沉淀反應后,在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min,將瓊脂糖珠離心至管底;將上清小心吸去,瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3-4次;***加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液,沸水煮5分鐘;
(6)SDS-PAGE, Western blotting或質譜儀分析。
注意的問題:
(1)細胞裂解采用溫和的裂解條件,不能破壞細胞內存在的所有蛋白質-蛋白質相互作用,多采用非離子變性劑(NP40或Triton X-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的,通過經驗確定。不能用高濃度的變性劑(0.2%SDS),細胞裂解液中要加各種酶抑制劑,如商品化的cocktailer。
(2)使用明確的抗體,可以將幾種抗體共同使用。
(3)使用對照抗體:

檢測EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環腫瘤細胞中表達的相關性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測組、MUC16免疫磁珠檢測組、2種磁珠均等混合檢測組。對來源于同一患者的等體積外周血樣本進行循環腫瘤細胞檢測,HE染色后鑒定檢測值。結果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對同體積、同來源樣本檢測值分別為22±11、14±6、28±12個腫瘤細胞(P0.05),說明檢測效率有統計學差異。結論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環腫瘤細胞中**表達且存在差異,因此增加MUC16這一***標志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數量。BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

免疫磁性細胞分選系統分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統,通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產物中的陽性細胞數,分離細胞的總細胞數×100%,細胞回收率:分離產物中的陽性細胞數,起始標本陽性細胞總數×100%。用免疫磁珠法檢測抗白念珠*烯醇化酶抗體。湖南anti-Flag COIP免疫磁珠生產廠家

CD3/CD28免疫磁珠法體外擴增外周血T淋巴細胞。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起

分離轉基因小鼠骨髓造血干細胞.運用針對小鼠干細胞表面特異表達的干細胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細胞,用流式細胞術(FACS)檢測MACS分離后骨髓細胞中干細胞(Sca-1陽性細胞)比例,監測細胞分選效果.結果顯示MACS分離后骨髓細胞中Sca-1陽性細胞所占比例達85%以上,涂片觀察發現細胞組成和細胞形態學特征與FACS所得結果一致.MACS可以從轉基因小鼠全骨髓細胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細胞,細胞純度可達85%以上.安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起

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