免疫磁珠技術(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內外研究的一種新的免疫學技術.隨著納米技術的不斷發展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細胞活性等優點,因此它能從大量外周血細胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結合能力;選擇6種不同的偶聯緩沖溶液,設置了6個主要偶聯時間和6組偶聯溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯條件.結果:制備的多克隆抗體效價為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯2h,偶聯抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達77.0%.結論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規的平皿增菌培養顯色法比較,檢測時間至少縮短20h.標記的腫瘤細胞免疫磁珠法分離和純化胚胎神經干細胞。安徽蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
免疫磁珠細胞分選方法可以在幾分鐘內從復雜的細胞混合物中分離出很高純度的細胞。把細胞用超級順磁性的免疫磁珠特異性地標記,磁性標記完后,把這些細胞通過一個放在強而穩定磁場中的分選柱。分選柱里的基質造成一個高梯度磁場。被磁性標記的細胞滯留在柱里而未被標記的細胞則流出。當分選柱移出磁場后,滯留柱內的磁性標記細胞就可以被洗脫出來,這樣就完全可以獲得標記和未標記的兩個細胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細胞的一百萬份之一,可與病毒的大小相比。標記細胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標記物間的反應可在幾分鐘內完成。由于微型磁珠的體積極小,所以不會對細胞造成機械性壓力,而且使孵育時間短,操作過程快。免疫磁珠形成一個穩定的膠體液,它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會***細胞或影響細胞的功能和活力,細胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽性分選出的細胞(即磁性標記細胞)可立即用于分析和隨后的實驗。吉林protein A/G COIP免疫磁珠市場報價BEENbio protein A/G Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。
兔前軟骨干細胞PSCs,(precartilagiousstemcells)的分離,培養方法及增殖,表型特征,為細胞移植***椎間盤退變,提供合適的種子細胞.[方法]取胎兔骨骺周圍軟骨膜(LaCroix環)中的細胞進行原代培養,然后采用免疫磁珠分離系統分選純化PSCs.體外培養,傳代,凍存復蘇,繪制生長曲線,觀察細胞特性.分別采用免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定純化后的PSCs.[結果]免疫磁珠分離可獲得純度較高的兔PSCs,培養后成活率高,細胞狀態良好.細胞凍存復蘇后,細胞增殖速度,細胞形態及表面標志物無明顯變化.免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定后,細胞都有明顯的PSCs表面特異性標記物的表達.[結論]PSCs存在于LaCroix環中,免疫磁珠分離法得到的PSCs,體外培養條件下,細胞增殖較快,生物學特性穩定.
微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經干細胞并進行培養,為研究神經干細胞的特性與神經干細胞的培養和移植研究創造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經巢蛋白(nestin)陽性的細胞群,以流式細胞術檢測陽性細胞純度,以臺盼藍染色法檢測細胞活性.結果分離的神經干細胞流式細胞儀檢測細胞nestin陽性表達率為(88.5±3.6)%,細胞存活率為(96.3±1.8)%.結論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經干細胞群落簡便,有效,可以為神經干細胞的細胞培養和移植提供細胞來源.抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠的制備及初步應用。
建立免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜牛長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.空腸彎曲菌免疫磁珠富集方法的建立。遼寧protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門
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利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經分離培養獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側坐骨神經,解剖鏡下剝離去除神經外膜,獲得神經束,將神經束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養液培養.7d后應用免疫磁珠法對細胞進行純化培養,培養2d后進行傳代接種.培養過程中對細胞進行形態學觀察,計數及活力測定;MTY法繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞化學熒光染色對細胞進行鑒定并且計算所得細胞純度.[結果]分離培養所得細胞即為雪旺細胞;采用免疫磁珠法能對培養所得雪旺細胞進行純化.純化后雪旺細胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養2d后就可以傳代.[結論]免疫磁珠法可以用于雪旺細胞的純化培養,所得雪旺細胞純度高,活力強,能滿足組織工程人工神經的需要.安徽蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
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