免疫共沉淀檢測（CO-IP）
BEENbio提供免疫共沉淀（CO-IP）檢測服務。可對兩種已知蛋白是否存在相互作用進行驗證，也可以驗證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實驗方法為將靶蛋白（X）與目的蛋白（Y）在同一細胞內孵育，形成“靶蛋白-目的蛋白”復合物。將靶蛋白的特異性抗體與復合物共孵育，形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復合物，利用Proterin A/G純化。通過SDS-PAGE銀染，結合Western Blot及液相質譜等對兩種蛋白之間是否存在相互作用進行定性分析。
服務優勢
? 使用銀染技術，靈敏度是考馬斯亮藍100倍，SDS-PAGE電泳結果更加清晰；
? 擁有液相質譜及Fortebio等完整配套檢測設備，可對檢測結果進一步分析；
? 實驗重復進行兩次，排除隨機因素影響，結果更加可靠；
? 擁有蛋白、抗體等制備平臺，您只需提供序列便可完成全部實驗；
密度梯度離心聯合上皮細胞黏附分子免疫磁珠富集法檢測卵巢Cancer循環腫瘤細胞及其與腫瘤復發轉移的相關性.吉林anti-Myc COIP免疫磁珠性能偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強作用.方法:經尾靜脈注射SPC-A1-luc細胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發光成像定量監測**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進行micro-CT掃描.利用免疫組織化學驗證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達.結果:免疫磁珠組在第4周即可檢測到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統計學意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無統計學意義(均P0.05).結論:偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強作用,并且有望用于肺*的早期診斷.湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠經銷商價格4折起自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細胞提取中的應用。
產品價格
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產品貨號
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規格
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價格
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BEENbio-PR004-0.4
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0.4 mL
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1150 RMB
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BEENbio -PR004-1
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1 mL
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1780 RMB
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BEENbio -PR004-5
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5 mL
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6825 RMB
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產品描述
BEENbio Anti Myc COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結合了大量的小鼠Anti Myc 單克隆抗體，與傳統的Anti Myc COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節省40%的時間。
產品特性
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項目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀（IP），Myc tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結合容量
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大于1.1 mg Myc tagged protein/mL 磁珠
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儲存條件
4oC長期穩定
使用說明
磁珠的準備
重懸Anti Myc 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。
樣品的結合（binding）
在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。
注意：結合過程中，磁珠可能會出現聚團或呈片狀，屬于正常現象，不會影響實驗結果。
洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。
洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進行SDS-PAGE檢測。
碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯抗體,制備可高效分離細胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進行反應,從而將抗體偶聯于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯接的抗體量及其免疫活性.結果HPPS檢測磁珠平均水力學粒徑為110nm;磁珠表面偶聯52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經磁分離后細胞的流式分析結果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細胞系(KG-1a)細胞,免疫磁珠均勻結合于細胞表面,且不影響細胞的活性.結論成功制備可用于細胞分離且不影響分離后細胞活性的新型免疫磁珠.免疫磁珠法富集循環腫瘤細胞研究進展。
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COIP 磁珠緩沖液匯總
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細胞裂解液
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正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
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結合緩沖液binding buffer
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用RIPA 細胞裂解緩沖液代替
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洗滌緩沖液Washing buffer
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PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
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洗脫緩沖液Elution buffer
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直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后，收集上清液檢測。
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免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細胞及其生物學特性鑒定。吉林anti-Myc COIP免疫磁珠性能
免疫磁珠法原代分離純化大鼠視網膜微血管周細胞,并確定其免疫組化特征.方法免疫磁珠法結合傳統的膠原酶消化及篩網過濾法分離出大鼠視網膜微血管周細胞,采用含有20%胎牛血清的DMEM培養.通過周細胞的形態和生長方式初步鑒別,再進行細胞α-SMA,vWF,GFAP抗體免疫組織化學特征鑒定,及激光共聚焦顯微鏡行周細胞PDGFR-β和desmin抗體熒光雙標觀察.周細胞生長曲線通過MTT法測定.結果本法獲得的周細胞純度可達98%,并能連續傳代.原代周細胞約2～3周融合,傳代后生長和融合速度加快,細胞形態不規則,胞內可見絲狀結構,無接觸性抑制.免疫組化證實周細胞胞漿內α-SMA蛋白表達陽性,內皮細胞特異性vWF因子表達陰性,膠質細胞特異性GFAP表達陰性.激光共聚焦顯示周細胞PDGFR-β和desmin抗原表達均為陽性.結論本研究***報道應用免疫磁珠法分離培養大鼠視網膜微血管周細胞.獲得高度純化的周細胞具有明確的免疫組化特征,可用于相關視網膜血管性疾病的進一步研究.吉林anti-Myc COIP免疫磁珠性能
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