探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.上海普平生物科技有限公司作為上海一家專業的免疫磁珠供應。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
免疫磁珠法(MACS):免疫磁珠法是2O世紀80年代出現的技術方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選,1990年,Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應,在細胞表面形成玫瑰花結,這些結合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下,就會與其他未被結合的細胞分群,具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性,這樣就可以篩選或去除所標記的細胞,從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術已經***運用于細胞及分子生物學,分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞,從而決定了這一方法在神經干細胞分選中應用的技術可行性。上海COIP免疫磁珠經銷商價格4折起您喜歡免疫磁珠的這些特點嗎?
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.
建立免疫磁珠法分離,并培養人腦膠質瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經干細胞無血清培養法培養出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經元小管相關蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白質(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結論免疫磁珠分選法可避免原代培養中眾多細胞混雜牛長的發生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結合磁珠后在體外可以長期培養和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質瘤干細胞的研究奠定基礎.根據您的具體需求選擇不同的免疫磁珠系列。
建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優化免疫磁珠法的反應條件,考察其精密度和特異性。收集經血培養確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結果進行比較。結果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內、批間變異系數(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應用價值。納米免疫磁珠富集單核增生李斯特菌的研究。浙江protein A/G COIP免疫磁珠送貨上門
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人腦**組織中分離,培養,純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分選陽性率;神經球計數法分析CD133+/-亞群細胞神經球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細胞表面神經干細胞(NSCs)標記物CD133,神經巢蛋白(nestin)表達情況;檢測CD133+/-亞群細胞經誘導分化后細胞表面分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達情況.結果:CD133+亞群細胞具有干細胞特性,可形成明顯的神經球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標記物CD133,nestin表達陽性,經誘導分化后分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達陽性;CD133-亞群細胞無上述特性.結論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
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