免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細(xì)胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來(lái)源多能成體祖細(xì)胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細(xì)胞通過(guò)CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負(fù)分選,錐蟲藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)計(jì)數(shù)MACS分選前后細(xì)胞活力.流式細(xì)胞儀鑒定分選后細(xì)胞純度;流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)細(xì)胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達(dá)情況.結(jié)果:通過(guò)MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細(xì)胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細(xì)胞生長(zhǎng)良好,**長(zhǎng)傳代到第20代.分選前后細(xì)胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無(wú)明顯差異;流式細(xì)胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細(xì)胞純度大于98%;流式細(xì)胞儀檢測(cè)hMAPCs中CD29陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞比率為99.2%,CD44陽(yáng)性細(xì)胞比率為98.3%,CD34陽(yáng)性細(xì)胞比率為1.2%,HLA-DR陽(yáng)性細(xì)胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負(fù)分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強(qiáng)的增殖能力.想要買免疫磁珠？您要先了解免疫磁珠的特點(diǎn)。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起

偶聯(lián)單抗NJ001的免疫磁珠對(duì)肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強(qiáng)作用.方法:經(jīng)尾靜脈注射SPC-A1-luc細(xì)胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發(fā)光成像定量監(jiān)測(cè)**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯(lián)NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進(jìn)行micro-CT掃描.利用免疫組織化學(xué)驗(yàn)證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達(dá).結(jié)果:免疫磁珠組在第4周即可檢測(cè)到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測(cè)到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05).結(jié)論:偶聯(lián)單抗NJ001的免疫磁珠對(duì)肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強(qiáng)作用,并且有望用于肺*的早期診斷.廣東anti-HA COIP免疫磁珠銷售上海普平生物科技有限公司銷售免疫磁珠價(jià)格低廉。

微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經(jīng)干細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng),為研究神經(jīng)干細(xì)胞的特性與神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)和移植研究創(chuàng)造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細(xì)胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經(jīng)巢蛋白(nestin)陽(yáng)性的細(xì)胞群,以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)陽(yáng)性細(xì)胞純度,以臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測(cè)細(xì)胞活性.結(jié)果分離的神經(jīng)干細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞nestin陽(yáng)性表達(dá)率為(88.5±3.6)%,細(xì)胞存活率為(96.3±1.8)%.結(jié)論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經(jīng)干細(xì)胞群落簡(jiǎn)便,有效,可以為神經(jīng)干細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)和移植提供細(xì)胞來(lái)源.

用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過(guò)Fmoc法固相化學(xué)合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價(jià)偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過(guò)IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測(cè)定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強(qiáng)的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達(dá)1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達(dá)79%.應(yīng)用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無(wú)反應(yīng)性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對(duì)某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應(yīng)用前景.免疫磁珠的主要特點(diǎn)有很多。

BEENbio鏈霉親和素磁珠本產(chǎn)品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價(jià)偶聯(lián)而成。這種微球能用于捕獲生物素標(biāo)記的底物，如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結(jié)合是***的非共價(jià)生物交互作用之一，因此，這也是親和層析法所使用的一種強(qiáng)大工具。生物分子可以與生物素輕松融合，而層析基質(zhì)上固定的鏈霉親和素配體可以與之結(jié)合，而且這種鏈霉親和素-生物素相互作用具有較低的非特異親和性，捕獲所需的底物能夠直接應(yīng)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢測(cè)、核酸純化、核酸固相雜交檢測(cè)、細(xì)胞分選等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。使用免疫磁珠的好處您了解多少呢？黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠哪家好

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免疫共沉淀（COIP）實(shí)驗(yàn)過(guò)程（1）轉(zhuǎn)染后24-48h可收獲細(xì)胞，加入適量細(xì)胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min,細(xì)胞裂解液于4°C，最大轉(zhuǎn)速離心30min后取上清；（2）取少量裂解液以備Westernblot分析，剩余裂解液加1μg相應(yīng)的抗體加入到細(xì)胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過(guò)夜；（3）取10μlproteinA瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3次，每次3,000rpm離心3min；（4）將預(yù)處理過(guò)的10μlproteinA瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過(guò)夜的細(xì)胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與proteinA瓊脂糖珠耦聯(lián)；（5）免疫沉淀反應(yīng)后，在4°C以3,000rpm速度離心3min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；***加入15μl的2×SDS上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；（6）SDS-PAGE,Westernblotting或質(zhì)譜儀分析。注意的問(wèn)題：（1）細(xì)胞裂解采用溫和的裂解條件，不能破壞細(xì)胞內(nèi)存在的所有蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用，多采用非離子變性劑（NP40或TritonX-100)。每種細(xì)胞的裂解條件是不一樣的，通過(guò)經(jīng)驗(yàn)確定。不能用高濃度的變性劑（0.2%SDS)，細(xì)胞裂解液中要加各種酶抑制劑，如商品化的cocktailer。（2）使用明確的抗體，可以將幾種抗體共同使用。（3）使用對(duì)照抗體：安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起

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