兔前軟骨干細(xì)胞PSCs,(precartilagiousstemcells)的分離,培養(yǎng)方法及增殖,表型特征,為細(xì)胞移植***椎間盤退變,提供合適的種子細(xì)胞.[方法]取胎兔骨骺周圍軟骨膜(LaCroix環(huán))中的細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),然后采用免疫磁珠分離系統(tǒng)分選純化PSCs.體外培養(yǎng),傳代,凍存復(fù)蘇,繪制生長(zhǎng)曲線,觀察細(xì)胞特性.分別采用免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定純化后的PSCs.[結(jié)果]免疫磁珠分離可獲得純度較高的兔PSCs,培養(yǎng)后成活率高,細(xì)胞狀態(tài)良好.細(xì)胞凍存復(fù)蘇后,細(xì)胞增殖速度,細(xì)胞形態(tài)及表面標(biāo)志物無明顯變化.免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定后,細(xì)胞都有明顯的PSCs表面特異性標(biāo)記物的表達(dá).[結(jié)論]PSCs存在于LaCroix環(huán)中,免疫磁珠分離法得到的PSCs,體外培養(yǎng)條件下,細(xì)胞增殖較快,生物學(xué)特性穩(wěn)定.上海普平生物科技有限公司主做免疫磁珠的批發(fā)銷售。黑龍江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起

微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經(jīng)干細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng),為研究神經(jīng)干細(xì)胞的特性與神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)和移植研究創(chuàng)造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細(xì)胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經(jīng)巢蛋白(nestin)陽性的細(xì)胞群,以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)陽性細(xì)胞純度,以臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測(cè)細(xì)胞活性.結(jié)果分離的神經(jīng)干細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞nestin陽性表達(dá)率為(88.5±3.6)%,細(xì)胞存活率為(96.3±1.8)%.結(jié)論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經(jīng)干細(xì)胞群落簡(jiǎn)便,有效,可以為神經(jīng)干細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)和移植提供細(xì)胞來源.安徽anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家對(duì)于不同的需求我們選擇不同的免疫磁珠系列。

常用的磁珠法DNA提取試劑盒，國(guó)外的有Dynal、Qiagen等，國(guó)內(nèi)將磁珠應(yīng)用于核酸提取的研究起源于02年左右，經(jīng)過近些年的反復(fù)試驗(yàn)，形成了穩(wěn)定的核酸提取體系，并已被***用于一些疾病（如乙肝、丙肝、結(jié)核菌）等的定量檢測(cè)（如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒）。國(guó)產(chǎn)磁珠法試劑盒與進(jìn)口產(chǎn)品相比，已不單單是只具有價(jià)格優(yōu)勢(shì)，其產(chǎn)品的穩(wěn)定性、高效性、提取出的核酸的質(zhì)量與產(chǎn)量都足以與進(jìn)口磁珠法試劑盒媲美。但是進(jìn)口試劑盒長(zhǎng)期以來形成的完善的銷售渠道對(duì)國(guó)產(chǎn)試劑盒的推廣是一大挑戰(zhàn)。

COIP常見問題及對(duì)策1：如何提高抗體與磁珠結(jié)合效率?磁珠與抗體的結(jié)合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關(guān)，請(qǐng)確認(rèn)抗體的類型與ProteinA/G配基的親和效率。如抗體所屬亞型與ProteinA/G的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時(shí)間（30～120min）、提高結(jié)合緩沖液的pH值（8～9）及降低離子強(qiáng)度（25～100mMNaCl）等方法提高親和效率。2：如何提高磁珠在免疫沉淀反應(yīng)中的特異性?可以先將抗體與樣品進(jìn)行孵育，形成抗體-抗原復(fù)合物，再用ProteinA/G磁珠捕獲復(fù)合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結(jié)合效率，并降低磁珠與樣品接觸的時(shí)間，從而提高沉淀產(chǎn)物的特異性。對(duì)于蛋白質(zhì)/核酸共沉淀或染色質(zhì)免疫共沉淀也推薦使用此法。上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質(zhì)量很好。

免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀(jì)80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細(xì)胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應(yīng)性的抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，在細(xì)胞表面形成玫瑰花結(jié)，這些結(jié)合了磁珠的細(xì)胞一旦置于強(qiáng)大的磁場(chǎng)下，就會(huì)與其他未被結(jié)合的細(xì)胞分群，具***順磁場(chǎng)的磁珠脫離磁場(chǎng)后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標(biāo)記的細(xì)胞，從而達(dá)到陽性或陰性選擇細(xì)胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運(yùn)用于細(xì)胞及分子生物學(xué)，分離基因、靶細(xì)胞及造血干細(xì)胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認(rèn)。免疫磁珠可以有效地分選細(xì)胞，從而決定了這一方法在神經(jīng)干細(xì)胞分選中應(yīng)用的技術(shù)可行性。上海普平生物科技有限公司從事免疫磁珠供應(yīng)。天津anti-Flag COIP免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)

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檢測(cè)EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中表達(dá)的相關(guān)性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測(cè)組、MUC16免疫磁珠檢測(cè)組、2種磁珠均等混合檢測(cè)組。對(duì)來源于同一患者的等體積外周血樣本進(jìn)行循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè),HE染色后鑒定檢測(cè)值。結(jié)果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對(duì)同體積、同來源樣本檢測(cè)值分別為22±11、14±6、28±12個(gè)腫瘤細(xì)胞(P0.05),說明檢測(cè)效率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中**表達(dá)且存在差異,因此增加MUC16這一***標(biāo)志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數(shù)量。黑龍江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起

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