重組蛋白含與不含 CF 有什么區別?CF,是 Carrier Free 的意思。一般來說,為了對重組蛋白的結構及活性進行保護,生產廠家會在蛋白產品中添加牛血清白蛋白(BSA)作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會對某些實驗造成影響,廠家又研發出不含載體蛋白(BSA)的產品,即 Carrier Free 蛋白。客戶如何選擇呢?在用途上,一般情況下,我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細胞或組織培養,或作為 ELISA 標準品。相對而言,當 BSA 可能會干擾實驗時,比如體內實驗、蛋白標記等,則推薦使用 CF 蛋白。另外,如果實驗平臺有特殊要求,也應根據要求選擇不含 BSA 的蛋白。重組蛋白藥物在醫學中作用顯著。進口BMP-1重組蛋白定制
重組蛋白的細菌表達系統有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇,大部分工程菌的增殖時間短,不僅便于快速評價實驗結果,而且降低了技術和設備無菌要求的嚴格性。無害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關系,可以通過產生維生素K 2使機體受益,并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養操作簡單、轉化和轉導效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規模地生產目的蛋白等優點,而且其表達外源基因產物的水平遠高于其它基因表達系統,表達的目的蛋白量甚至能超過細菌總蛋白量的30%,對小分子蛋白的生產具有極大的優勢,因此大腸桿菌是目前應用多的重組蛋白質表達系統。進口IGF-II重組蛋白重組蛋白的活性高低,是實驗成功的關鍵。
量化生產的重組蛋白種類有限,如果購買不到所需蛋白,則需要重組蛋白定制服務。對于特定的應用,使用正確的蛋白表達系統是實驗成功的因素。以義翹神州為例,義翹神州的重組蛋白表達服務,擁有多年的重組蛋白表達經驗,提供從基因合成、載體構建到蛋白表達及純化的一站式服務。擁有多種重組蛋白表達系統,包括原核生物蛋白表達系統、酵母蛋白表達系統、昆蟲細胞蛋白表達系統(桿狀病毒)、哺乳動物細胞蛋白表達系統。具備多種純化體系,為蛋白表達與純化方面提供多種選擇。自公司成立以來,已成功表達約6000 個毫克至克級的不同種屬的重組蛋白。每年1000個新蛋白的研制和生產能力以及快速解決研發和生產問題的能力。擁有近百個2L 到1000L 不同體積的發酵罐和超過30 種重組蛋白純化體系,可以滿足高通量及大規模的重組蛋白表達需求。
哺乳動物蛋白表達系統在生產重組蛋白中的應用中,優勢明顯。具體表現為以下方面,能實現翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復性:哺乳動物為真核細胞,細胞器可以對蛋白正確折疊加工。表達水平高:載體可在哺乳動物細胞中高表達重組蛋白,表達量可高達1-3g/L。蛋白表達高效穩定:高效啟動子控制,穩定表達,并可以選擇多種表達,如瞬時表達、穩定細胞株表達、營養缺陷型細胞株表達(DHFR/GS)、大規模懸浮細胞表達等。適合大規模蛋白表達:常用的哺乳動物表達宿主細胞(HEK293和CHO),使用懸浮細胞培養,可以在一個月內可產生數克級蛋白。選擇高品質重組蛋白和生長因子。
蛋白質生物學不僅包含研究內容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白質結構及功能的研究,和利用抗體、蛋白及多肽等作為純化、檢測和分析生物系統的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作為實驗室的常規實驗方法使用了多年。其它方法如定量蛋白質譜的實驗方法則是相對較新的實驗技術,并且正在快速發展中。針對重組蛋白純化,賽默飛提供種類豐富的標簽選擇,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。還提供一系列磁珠和樹脂等純化產品,磁珠、磁性瓊脂糖、散裝樹脂、離心柱或試劑盒,FPLC層析柱,96孔過濾板等,用于從大腸桿菌、酵母、昆蟲或哺乳動物表達系統中純化從微克(μg)到低千克(kg)級重組蛋白。可滿足大多實驗的需求,包括高通量篩選、批量處理、中試和工藝純化等。嚴格的質量控制系統, 才能保證重組蛋白產品的生物活化與一致性。進口BMP-1重組蛋白定制
重組蛋白與重組融合蛋白的區別。進口BMP-1重組蛋白定制
市場上重組蛋白通常以凍干形式售賣,這是因為蛋白質對熱敏感,凍干能使蛋白質在存儲過程中保持活性,延長保存時間,同時也能降低運輸成本。但是凍干對蛋白質的活性會有一定的影響,可能造成蛋白質部分失活、聚集和其它變性等。這個時候,就需要通過加入保護劑(穩定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負面的影響,盡可能的保護蛋白的活性。常見的保護劑或穩定劑包括糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。進口BMP-1重組蛋白定制
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