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昆明雙折射性紡錘體揭示卵母細胞關鍵結構

來源: 發布時間:2025-04-03

冷凍電鏡技術(Cryo-EM)近年來在結構生物學領域取得了重大突破,也為紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。通過將生物樣品冷凍至極低溫并在電子顯微鏡下進行觀察和成像,冷凍電鏡能夠揭示生物大分子的高分辨率結構,包括紡錘體微管等精細結構。這一技術不僅克服了傳統電鏡技術對樣品制備的嚴格要求,還能夠在接近生理狀態下觀察紡錘體的形態和功能,為無損觀察紡錘體提供了強有力的技術支持。無損觀察紡錘體技術能夠實時監測冷凍過程中紡錘體的形態變化,從而準確評估冷凍保存的效果。通過對比冷凍前后紡錘體的形態和穩定性,研究者可以優化冷凍保護劑的配方和濃度,以及改進冷凍程序,減少冷凍損傷,提高解凍后卵母細胞的存活率和發育潛能。紡錘體微管的微妙調整,確保了遺傳信息在細胞分裂中的準確無誤傳遞。昆明雙折射性紡錘體揭示卵母細胞關鍵結構

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    基因編輯技術是一種可以精確修改基因序列的方法,如CRISPR/Cas9、TALENs和ZFNs等。這些技術已經被廣泛應用于基因領域,并取得了明顯的成果。在修復紡錘體異常方面,基因編輯技術可以通過精確修改導致紡錘體異常的致病基因,從而恢復紡錘體的正常功能。例如,針對某些遺傳性疾病中紡錘體相關基因的突變,基因編輯技術可以直接修復這些突變,從而來改善患者的病情。基因轉移是將正常基因導入到患者細胞中,以替代或補充致病基因的方法。 香港紡錘體提高冷凍保存效率紡錘體的形成需要多種蛋白質的參與,包括微管相關蛋白和中心體蛋白等。

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    微管重組技術是體外構建紡錘體模型的基礎。通過在體外重組微管蛋白,可以形成類似于細胞內紡錘體的微管結構。常見的方法包括:從牛腦或其他來源中純化微管蛋白,確保其純度和活性。在體外條件下,通過控制溫度、離子濃度等參數,誘導微管蛋白組裝成微管。使用微管穩定劑(如紫杉醇)或調節蛋白(如MAPs)穩定微管結構,模擬細胞內的微管動態變化。動力蛋白和調節蛋白是紡錘體功能的重要組成部分。通過在體外模型中添加這些蛋白,可以模擬紡錘體的動力學行為。常見的方法包括:添加動力蛋白(如dynein、kinesin)以模擬微管的運動和動力學行為。添加調節蛋白(如AuroraB、Mad2)以模擬紡錘體檢查點的功能。

液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數碼成像技術結合起來的成像系統,能夠觀測到具有雙折性特征的細胞結構,如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統無需對細胞進行固定和染色,因此能夠評估卵母細胞的質量與紡錘體、透明帶等的相關性。在紡錘體卵冷凍研究中,Polscope成像系統可用于實時監測冷凍過程中紡錘體的形態變化,評估冷凍保護劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外,解凍后也可利用Polscope成像系統評估紡錘體的恢復情況和穩定性,從而篩選出高質量的卵母細胞進行后續操作。紡錘體的微管從中心體向外輻射,形成紡錘狀結構。

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Oosight影像分析系統采用液晶偏光成像技術,無需對卵母細胞進行染色,即可實時、清晰、高對比度地進行紡錘體結構和透明帶成像,對ICSI、核移植操作、卵母細胞質量評價等有很好的輔助作用。

主要應用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細胞,避免卵的破裂損傷,增強胚胎的發育潛能。卵評估:利用定量的分析數據對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。體外成熟評估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據采用的是準確的識別紡錘體,而非不準確的極體。質量控制:利用定量的分析數據對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。

核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質,使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對冷凍的初級卵母細胞進行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測胚胎中紡錘體的發育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養箱的顯微鏡)。可以對染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測量卵母細胞的透明帶;準確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態 紡錘體的形成需要多種蛋白質的精確協作與調控。美國卵母細胞紡錘體揭示卵母細胞關鍵結構

紡錘體的異常可能與人類衰老和疾病的發生有關。昆明雙折射性紡錘體揭示卵母細胞關鍵結構

紡錘體是卵母細胞在減數分裂過程中形成的一種微管結構,負責精確分離染色體。然而,紡錘體對環境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感,在冷凍保存過程中容易發生損傷,導致染色體分離異常,進而影響卵母細胞的發育潛力和受精后的胚胎質量。因此,如何有效監測和評估冷凍過程中紡錘體的變化,成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實時成像技術的出現,為這一問題的解決提供了可能。紡錘體實時成像技術主要利用高分辨率顯微鏡結合熒光標記技術,對卵母細胞內的紡錘體進行實時、動態的觀察和記錄。常用的熒光標記方法包括使用綠色熒光蛋白(GFP)標記微管蛋白,以及利用特定抗體對紡錘體相關蛋白進行染色。通過這些方法,研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態、位置、動態變化等信息,從而準確評估冷凍過程中紡錘體的穩定性和完整性。昆明雙折射性紡錘體揭示卵母細胞關鍵結構

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