男科實驗室中通常所指的質量包含三個方面:實驗室內部質量、醫生處置的質量以及結果的質量[3]。1.實驗室內部質量與**分析有關的實驗室內部質量主要是工作人員的素質和所采用儀器的質量。工作人員應經過特殊的培訓?儀器必須處于正常狀態、確保準確的結果?操作應符合規程[4]。CASA系統本身的質量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關軟件的數學上、信息性的、統計學的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。在男科和輔助生殖技術領域,精子質量的評估是診斷和處理的重要環節。香港人精子分析頻閃光源
醫生處置質量是指診斷質量?是以當今醫學科學知識、技術為基礎依據癥狀來完成的。CASA系統可以為醫生提供優于傳統精子分析的手段和快速準確的分析結果[5]。CASA在醫生處置質量方面的特點在于:①當CASA系統的參數設定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內和個體間的比較?CASA的精子活力重復性明顯好于直觀評估[6]。②實驗室數據資料是質量的一部分?CASA系統所有數據都是直接在線獲得的?因此明顯優于其他方法[6]?記錄傳遞到數據庫的過程無錯誤發生?可清楚準確地打印出結果。所有的數據可直接轉換到數據庫、能夠對***前和***后測定的數據進行統計學比較[9]、質量控制數據的采集與保存、每天的標本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數據的處理只有在計算機中才能完成。但是CASA系統的參數設定也許限制了其質量?特別是在精子形態學檢查中?通過CASA系統對精子形態學特征進行分析[7]?這些特征(細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結果一致性較差[8]。就形態學分析而言?傳統方法的可變性遠遠大于CASA分析。香港人精子分析頻閃光源IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點,能夠捕捉到微小的細節和變化,進一步提高了精子分析的準確性。
精液顯微鏡檢查(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應為80%~90%,精子存活率降低是導致不育的重要原因。(2)精子活動力:指精子活動狀態,也是指活動精子的質量。世界衛生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級:①精子活動好,運動迅速,活潑有力,直線向前運動;②精子活動較好,運動速度尚可,游動方向不定,呈直線或非直線運動,帶有回旋;③精子運動不良,運動遲緩,原地打轉或抖動,向前運動能力差;④死精子,精子完全不活動。正常精子活動力應在③級以上,若>40%的精子活動不良(③、④)級,常是導致男性不育的重要原因。精子活動力低,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統非特異性***,應用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。
采集精液前5~7天內必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈。可采用**法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應與室溫相同;瓶子不應過大,但瓶口不應過小,以免將精液射出瓶外;還應貼上標簽,記錄姓名及取精時間。在冷天應將精液標本保溫,放置在貼身內衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時內送到實驗室。Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質量評估設備。
二、生化及免疫學檢驗:5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L。【臨床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關。現認為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性。【臨床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動,干擾精子的運行,阻礙精子穿透及精卵結合,使受精發生障礙。即使已經受精,也可能影響發育中的胚胎,造成免疫性流產。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時,系精子外逸而產生的自身抗體。該設備的設計緊湊,占用空間小,適合不同規模的實驗室使用。香港狗精子分析WOB
CASA系統可以給出多種精子運動狀態的參數,這些參數能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。香港人精子分析頻閃光源
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數;變異系數(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。香港人精子分析頻閃光源