RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。
RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。
RPMI-1640培養基常初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常為廣的培養基之一。
RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。
Ham’s F-12營養混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10營養混合物為基礎設計而成的。山東DMEM細胞培養基批發廠
CMRL培養基是由康諾特醫學研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)設計出來的,初用于L細胞(Earle)的無血清培養。CMRL培養基添加馬血清或小牛血清后,特別適用于猴腎細胞的克隆培養以及其他哺乳動物細胞系的培養。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染;為保持本產品的比較好使用效果,請勿進行凍融處理;本產品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和。廣東DMEM細胞培養基全國發貨Eagle培養基由Harry Eagle在Eagle基本培養基(BEM)的基礎上發展而來的。
在細胞培養實驗里,DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后,應及時存放于 2-8°C 的環境中,低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度,確保其營養成分的穩定性。在使用前,需將培養基預熱至 37°C,模擬人體體溫環境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統,需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間,為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。
無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。即用型DMEM/F12,確保細胞活力與實驗結果可靠性。
L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似,連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需要。RPMI-1640培養基初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已應用于各種正常細胞ai細胞的培養。海南細胞培養基廠家
Dulbecco’s 改良培養基與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍。山東DMEM細胞培養基批發廠
動物細胞培養(animalcellculture)就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和增殖。細胞培養基的種類有哪些?按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。2.神經元基礎培養基可為神經元生長提供基礎營養物質。IPL-41昆蟲培養基(IPL-41InsectMedium)旨在用于大規模擴增草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)細胞系,也常用于通過桿狀病毒表達系統(BEVS)進行蛋白表達。IPL-41培養基是對原始IPL配方的改良,由美國農業部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發,用于大規模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎培養基中加入了胎牛血清和TPB培養基(TryptosePhosphateBroth),成功地實現了IPL-21AE。山東DMEM細胞培養基批發廠
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