細胞培養基的種類很多,按其來源分為合成培養基和天然培養基(目前使用的培養基絕大部分是合成培養基),按其物質狀態分為干粉培養基和液體培養基兩類。干粉培養基需由實驗者自己配制并滅菌,液體培養基由專業商家提供,用戶可直接使用,非常方便。1、合成培養基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質:氨基酸氨基酸是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。因此,各種培養液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養液內。已含谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2周以上時,還應重新加入原來量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖和醋酸等。無機鹽培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調節細胞膜功能。DMEM 由 Eagle 培養基改良而來,氨基酸、維生素濃度高,為細胞生長供能助力 。甘肅細胞培養基批發
DMEM 培養基具備多種實用配方,以滿足不同細胞的生長需求。其中,高糖型(葡萄糖濃度 4500mg/L)和低糖型(葡萄糖濃度 1000mg/L)為常見。高糖型 DMEM 培養基猶如為代謝旺盛的細胞量身定制,為其提供充足的能量來源,促使細胞快速生長、增殖,尤其適用于像腫瘤細胞這類生長迅猛、對能量需求高的細胞。而低糖型 DMEM 培養基則更契合代謝較為緩慢的細胞,為它們營造溫和穩定的生長環境,保障細胞正常代謝與功能維持,在細胞培養過程中,科研人員可依據細胞特性靈活選用合適配方。廣西DMEM細胞培養基廠家Ham’s F-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養基營養更為豐富,使用更為廣。
1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富,培養效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。
DMEM 培養基成分復雜且精妙,除了富含氨基酸、維生素、葡萄糖、等主要成分外,還包含多種無機鹽。這些無機鹽在維持細胞內外滲透壓平衡方面發揮著關鍵作用,確保細胞不會因滲透壓異常而出現失水皺縮或吸水膨脹等情況,維持細胞正常形態。同時,無機鹽中的離子,如鈣離子、鎂離子等,參與細胞內的信號傳導過程,影響細胞的生長、分化和代謝等生理活動,為細胞的生命活動提供穩定的離子環境,與其他營養成分協同作用,共同促進細胞的健康生長。M199全稱Medium 199,廣泛應用于各種動物細胞的培養,包括一些非哺乳類動物細胞。
MEMα是一種改良的MEM培養基,與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,**適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。 TNM-FH昆蟲培養基不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。吉林正規細胞培養基供應商
Dulbecco’s 改良培養基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)是在MEM培養基的基礎上研制的。甘肅細胞培養基批發
病毒學研究領域,DMEM 培養基也是不可或缺的重要材料。它可用于培養病毒顆粒,為深入研究病毒的生命周期創造條件。在 DMEM 培養基構建的環境中,病毒宿主細胞,并完成吸附、侵入、復制、裝配和釋放等一系列生命活動。科研人員借此觀察病毒復制過程,了解病毒如何利用宿主細胞的物質和能量進行自身繁殖,進而篩選出有效的抗病毒藥物。例如,在流感病毒研究中,利用 DMEM 培養基培養流感病毒,研究其變異規律及對不同藥物的敏感性,為流感防治提供有力支持。
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