1.細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。M199特別適用于非轉化細胞的培養(yǎng)，也常用于病毒學、以及大鼠胰腺上皮細胞和小鼠晶狀體組織的培養(yǎng)。河南iclean細胞培養(yǎng)基檢測

    RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來的，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的，現在已應用于各種正常細胞培養(yǎng)，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞，是培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養(yǎng)應用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。江蘇DMEM細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨Leibovitz’s L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng)，但其在溶液中不安定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發(fā)的降解。細胞運用其機制是：在細胞培訓時，細胞會日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像，連續(xù)的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無須適應，并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間，縮減傳代次數，即節(jié)約了時間也節(jié)省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓的細胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產非須要氨基酸的副作用，有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需。

RPMI-1640細胞培養(yǎng)基是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的，現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng)，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞，是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。

RPMI-1640細胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑，可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會自發(fā)的降解。 DMEM/F12：經典雙培養(yǎng)基配方，為各類細胞提供均衡營養(yǎng)與穩(wěn)定生長環(huán)境。

    含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成（采用平衡鹽溶液溶解）與合成培養(yǎng)基（如MEM細胞培養(yǎng)基）以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外，血清含一些對細胞產生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。目前，血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用，使用濃度一般為5~20%，常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復雜，批間差異大及存在病毒等外源污染風險，對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響，在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此，基于對血漿成份的分析，合成細胞培養(yǎng)基應運而生。合成培養(yǎng)基是根據天然培養(yǎng)基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM）。McCoy’s 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細胞建系，以及一些淋巴細胞和較難培養(yǎng)的細胞的培養(yǎng)。河南iclean細胞培養(yǎng)基檢測

MCDB是為特定細胞設計的低蛋白和無血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基。河南iclean細胞培養(yǎng)基檢測

Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng)。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，其中，青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合，抑制細菌蛋白質的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質、脂類或任何生長因子，故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。 河南iclean細胞培養(yǎng)基檢測

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