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組織熒光染料細胞膜

來源: 發布時間:2024-06-01

其他細胞結構常用染料生物染料在細胞結構和組分鑒定中有著廣泛的應用,除細胞膜研究外,我們經常也會對一些其它細胞結構及成分進行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質、細胞核等,而對于不同的細胞結構有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細胞核染色,可將細胞核染成藍色。鬼筆環肽(Phalloidin)是細胞骨架的染色神器,羅丹明標記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態變化時經常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環肽(橙紅)染色的細胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍色)染色的細胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調前后PDAC細胞形態的變化。DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)對活細胞進行多色成像和流式分析。組織熒光染料細胞膜

SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級)儲存條件及注意事項4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性。●靈敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍。●信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。●操作簡單:無須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。●適用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等。●使用方便:對分子生物學中常用的酶(如:Taq酶、反轉錄酶、內切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。●經濟:價格比銀染便宜。湖北納米熒光染料熒光素衍生物具有高吸收率優異的熒光量子產率和良好的水溶性是流式細胞儀和免疫熒光中常用的熒光標記之一。

FITC熒光標記蛋白的應用及特點:活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標記抗體或蛋白質功能基團,生成分子探針,并通過熒光成像進行檢測。當用熒光染料化學標記特異性抗體或其他純化生物分子時,它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,用于細胞成像、流式細胞手術、蛋白質痕跡和酶聯免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標記物具有無放射物污染、操作簡單等優點,在蛋白質功能研究、藥物篩選等許多研究領域得到了越來越廣泛的應用。

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)

且Super Fluor活化酯(與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同)

異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC):FITC是應用*為***的一種熒光素,經激光激發后發出明亮的黃綠色熒光,*大發射波長為525nm。FITC的熒光強度受PH影響較大,常隨著PH的降低而減弱,因此,在使用FITC時需格外注意溶液的酸堿度。a)電泳分離后的蛋白質檢測(b)蛋白質和肽的微測序分析(c)使用毛細管區帶電泳進行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(e)細胞和組織切片中的抗原檢測(f)通過標記DNA片段進行細胞凋亡檢測除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯物制備外,異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光(由于偶聯后的大消光系數和高量子產率),使其成為許多工藝的優先染料。在流式細胞術和免疫熒光顯微術中,染料與各種抗體(一抗或二抗)結合,以檢查和研究IL-17免疫缺陷和CD63在腎功能中的作用等狀態。作為熒光素的衍生物,異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應基團,這有助于其對通常存在于生物分子中的動漫和巰基基團具有反應性。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。

1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲存液:儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲存液保存在-20°C,避免反復凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5μM的工作液。注意:工作液的**終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細胞染色(1)懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培養細胞2~20分鐘,不同的細胞比較好培養時間不同。(3)染色細胞試管在1000~1500轉離心5分鐘。(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預溫37℃的培養液。(5)重復(3),(4)步驟兩次以上。 熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復合熒光染料使用。中國香港熒光染料紅色

與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機染料。組織熒光染料細胞膜

常用抗體標記熒光染料的特性及其應用

1、FITC:激發波長488nm,比較大發射波長525nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術4)熒光強度易受PH值影響,PH值降低時其熒光強度減弱。2、AlexaFluor488:激發波長488nm,比較大發射波長519nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)具有超乎尋常的光穩定性,非常適用于熒光顯微鏡技術;4)在較寬的PH值范圍內保持穩定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)質優價廉,歡迎咨詢。3、Cy3:激發波長488nm,比較大發射波長570nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL2通道檢測:3)適用于熒光顯微鏡技術;4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術,熒光強度低于PE。 組織熒光染料細胞膜

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