FITC熒光標記蛋白的應用及特點:活性熒光染料，如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料，可用于標記抗體或蛋白質功能基團，生成分子探針，并通過熒光成像進行檢測。當用熒光染料化學標記特異性抗體或其他純化生物分子時，它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針，用于細胞成像、流式細胞手術、蛋白質痕跡和酶聯免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標記物具有無放射物污染、操作簡單等優點，在蛋白質功能研究、藥物篩選等許多研究領域得到了越來越廣泛的應用。
南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列（效果同Alexa Fluor系列）
且Super Fluor活化酯（與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同） Super Fluor 555（效果同Alexa Fluor 555）琥珀酰亞胺酯熒光染料。內蒙古熒光染料DAPI
管可用于實驗室的熒光團數量眾多，但這些染料通常屬于以下三組之一：熒光染料:這些是用于在體外標記生物相關分子的小型有機天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質，由于它們的大分子結構而發出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點:這些高熒光合成納米晶體由半導體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應用和該領域的顯著進步，已經針對特定應用和儀器開發和優化了數百種活性熒光染料。同樣，多年來，大量復雜的熒光技術（例如，FRET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS）也在不斷發展。光敏劑熒光染料Cy3吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應用。
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸，納米粒子通常用于不同類型的細胞和組織的熒光成像。當今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點、貴金屬納米顆粒、聚合物點、量子點和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中，與其他分子熒光團和探針相比，納米顆粒/納米材料具有多種優勢，使其成為理想的選擇。除了提高亮度外，納米粒子是惰性的并且往往分布均勻，這有助于在成像過程中獲得更好的結果。此外，與各種分子熒光團相比，納米顆粒和納米材料沒有細胞毒性，并且不受非特異性結合問題的影響。由于這些特性，大多數熒光納米顆粒（染色納米顆粒）可以內化到細胞/組織中，并容易靶向給定部位。
羰花青染料***用作Di來標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR，以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標記膜和其他疏水結構。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們在脂質環境中具有極高的消光系數、環境依賴性熒光和短的激發態壽命。它們在室溫下是油狀物，在水中發出微弱熒光，但當摻入膜中或與親脂性生物分子結合時，它們發出高熒光且相當耐光。這些光學特性使它們成為細胞質膜染色的理想選擇。一旦應用于細胞，這些染料就會在質膜內橫向擴散，導致整個細胞染色[1]。DiO、DiI、DiD和DiR呈現出不同的綠色、橙色、紅色和紅外熒光，從而促進活細胞的多色成像和流式細胞術分析。DiO和DiI可分別與標準FITC和TRITC過濾器一起使用。其中DiI及其類似物是**常用的，因為它們通常表現出非常低的細胞毒性。此外，DiI***用于測定LDL和HDL等脂蛋白。親脂性氨基苯乙烯基染料DiA也常用于神經元示蹤[2]。熒光素衍生物具有高吸收率優異的熒光量子產率和良好的水溶性是流式細胞儀和免疫熒光中常用的熒光標記之一。
過標記——計算結果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團大于10mol。雖然過標記的蛋白也可以使用，但可能會引起蛋白的聚集、降低抗體結合抗原的特異性，這些都會造成非特異性結合。過標記還會引起熒光淬滅?？梢栽黾拥鞍谆驕p少反應時間。3．未結合染料難以去除——盡管大部分時候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯物，但仍可能會有痕量的游離染料留在偶聯物溶液中，會使標記計算的值偏高。可用分離柱再次分離或透析去除。4．蛋白或蛋白偶聯物無法洗脫——不要再加緩沖液，只需再次離心一次或幾次。吲哚菁綠（Indocyanine Green，簡稱ICG）是一種廣泛應用于醫學和生物領域的熒光染料。光敏劑熒光染料Cy3
DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織，在小動物成像中用來示蹤。內蒙古熒光染料DAPI
染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標記細胞膜和疏水性組織。這是一類環境敏感型熒光染料，當它們與膜結合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質，雖然在水中其熒光強度很弱)結合時，其熒光強度***增強。它們具有很高的淬滅系數，偏光依賴性和很短的激發壽命。一旦應用于細胞中，這種染料會在細胞內質膜中逐步擴散，導致在其比較好濃度條件下，將整個細胞染色。它們不同的熒光顏色：DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細胞多色彩熒光成像分析和流式細胞術提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標準的FITC和TRITC濾光器一同使用。其中，DiO可以被633 nm He-Ne激光激發，并且具有比DiI更長的激發和發射光波長，為標記細胞和組織的那些本身就具有本底熒光的染料提供了非常***的替代品。DiR在***成像或者示蹤中非常有用，因為它們所發射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，并且在紅外光范圍內，其本底熒光水平很低。內蒙古熒光染料DAPI