小師弟:如何根據細胞STR鑒定結果判斷細胞系是否發生了交叉污染?如果存在細胞系之間發生交叉污染,而且鑒定用的細胞可能有兩種以上的細胞系時,那么在進行STR位點檢測的時候,多個位點會出現兩個以上的峰。峰高值表示該等位基因的信號強度,理論上峰值與樣本的DNA濃度有直接的關系。因此,存在交叉污染的混合細胞系中,其中一個位點中某些峰會明顯高于其他的峰,其中大峰是屬于混合細胞系中那個主要細胞系,而小峰則屬于那個次要細胞系。如何提供細胞系鑒定樣本?廣州鑒定機構
如果您正處于以下幾種情況,請及時對自己手里的細胞進行STR鑒定:1、發表文章或申請課題經費前;2、使用細胞進行臨床醫治(試驗)、準備凍存保種或已凍存多年的細胞;4、一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時;5、新得到的細胞或實驗室傳5代以上的細胞;6、細胞系表現不穩定或結果與預期差別較大﹔7、異體細胞移植后嵌合情況檢查。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,至今已有十六年歷史,專注于為國內科研工作者和生物醫藥企業提供各類分子遺傳學技術服務和質控試臍盒。成都細胞STR鑒定位點本文使用的Hela**細胞,由上海翼和應用生物技術有限公司鑒定。
短串聯重復序列(short tandem repeat,STR),又稱為微衛星標記(microsalite)。它普遍并均勻地存在于真核生物基因組中,一般由一個長2~6bp的中心序列經多次串聯重復排列而成,重復次數大多在10~60次之間。個體間中心序列的重復次數呈高度變異性,構成了STR的遺傳多態性。由于其序列簡短,通過PCR很容易從基因組DNA中特異性地擴增出來,極大簡化了微衛星多態性分析的操作。研究者只需在目標基因座設計一對或多對引物,通過PCR反應從模板DNA中將該基因擴增出來,然后使用測序儀進行電泳分離分析即可。它具有分布普遍,易于檢測,信息量大,有高度多態性并遵循孟德爾共顯性遺傳等優點,被認為是繼限制性片段長度多態性(RFLP)之后的第二代遺傳標記,已普遍應用于遺傳圖譜繪制、基因定位、法醫鑒定、遺傳病診斷等諸多領域。
翼和采用PCR 檢測法,含有化學修飾熱啟動酶的 2×PCR mix,配以 dUTP 和UDG 酶,可很大程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,有效防止 PCR 產物的交叉污染。對細胞培養樣本內支原體16S rRNA 基因高度保守區域特異性片段進行擴增檢測,與含有支原體的陽性標準品和不含有支原體的陰性標準品比對,鑒定支原體污染的現象,能夠檢測包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多種支原體。細胞STR鑒定助力論文發表Cancer Research。
細胞STR鑒定——給你的細胞一個“明明白白的”身份,正如人類個體有指紋識別一樣,每種細胞系也有它獨特的“指紋”:STR。STR,全稱Short tandem repeat ,中文名“短串聯重復序列”,是一類普遍存在于真核生物基因組中的DNA串聯重復序列。由于不同個體來源的細胞在不同STR位點具有特異性的重復次數,因而使得不同細胞具有其特征性的圖譜,根據圖譜的數據可以判定細胞是否為單一細胞。近年來,大量研究表明STR基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的有效和準確的方法之一,目前,此方法已被ICLAC、ATCC等機構作為金標準應用于細胞鑒定。討論細胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來越多的的期刊要求文章發表前、需提供細胞鑒定數據。天津小鼠STR鑒定數據庫
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上海翼和公司采用PCR擴增和一代測序技術獲得線粒體COI基因區DNA序列信息,并與數據庫比對鑒定動物DNA樣本的種屬。不同種的動物都具有各自特異的線粒體COI基因序列,因此利用COI基因序列進行動物種屬的鑒定成為一種標準的技術方案。上海翼和應用生物技術有限公司是上海市遺傳學會理事單位,至今已有十六年歷史,專注于為國內科研工作者和生物醫藥企業提供各類分子遺傳學技術服務和質控試劑盒.基于自主知識產權的多重PCR技術,翼和生物研發和改良了適用于熒光定量PCR一代測序和二代高通量測序平臺的多種檢測技術和產品,逐步形成了在細胞組織和動物模型質控、大健康檢測和科學研究3大板塊產品布局。近年來,翼和生物在首席科學家肖君華教授帶領下,研發推出了10多項創新技術和產品,并致力于建設符合國家和國際標準的檢測實驗室。這給企業注入了新的生命力,促進了翼和生物的高速發展。未來,翼和生物必將發展成為該領域的專業供應商。廣州鑒定機構
上海翼和應用生物技術有限公司位于龍騰路1015弄中星創意園2號502。公司業務涵蓋細胞組織小鼠質控,大健康檢測,生物技術服務等,價格合理,品質有保證。公司將不斷增強企業重點競爭力,努力學習行業知識,遵守行業規范,植根于醫藥健康行業的發展。翼和生物秉承“客戶為尊、服務為榮、創意為先、技術為實”的經營理念,全力打造公司的重點競爭力。