高分辨率熔解（High-resolutionmelting，簡稱HRM）分析是一門新興的技術。它通過PCR之后的熔解曲線分析，就能檢測PCR片段的微小序列差異，從而應用在突變掃描、序列配對和基因分型等多個方面。憑借其速度和簡便性，高分辨率熔解這種方法正在迅速普及。其實雙鏈DNA的熔解分析可追溯到上世紀六十年代，當時是通過紫外吸收來監測的。分析需要幾微克的DNA，而樣品以0.1-1.0°C/分鐘的速率緩慢加熱，常常要花上幾個小時才能完成。后來，LightCycler定量PCR儀的出現，讓熒光熔解分析變得流行。樣品量因毛細管而縮減至納克級，且熔解速率更快，達0.1-1.0°C/秒，這樣熔解時間縮短至幾分鐘。當時使用的染料是SYBR?GreenI。SNP是人類可遺傳的變異中比較常見的一種。占所有已知多態性的90%以上。廣州STR/SSR基因SNP分型分析

片段長度多態性（限制性內切酶）法——RFLP（RestrictionFragmentLengthPolymorphism）法的基本原理是通過PCR擴增目的片段DNA，擴增產物再用特異性內切酶酶切成不同大小的片段，直接通過凝膠電泳分辨基因型。不同等位基因的限制性酶切位點分布不同，產生不同長度的DN*段條帶。上海翼和**團隊富有開創精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領下，秉承“專業、協作、進取”的企業精神，為科研用戶提供性價比高、高質量可靠的遺傳學技術服務和產品。微信公眾號：上海翼和生物杭州STR/SSRSNP分型公司但是只要這個突變群沒有達到總群體的1%，它就只是一個突變株/系。達到了1%就是多態性了。

隨著二代測序技術的普及，相比Sanger測序，二代測序雖然降低了測序讀長，但是極大增加的測序通量同時大幅降低測序成本。利用二代測序進行SNP分型，不僅測序讀長滿足分型需求，并且可以同時對數十數百個位點，上千樣本進行分型。二代測序結果判斷準確直觀，相比RFLP，Taqman，LDR等方法都通過間接結果來進行分型結果的判定，直接測序或二代測序法分型能都直接看到位點具體序列情況，SNP位點判斷更加直觀。上海翼和**團隊富有開創精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領下，秉承“專業、協作、進取”的企業精神，為科研用戶提供性價比高、可靠的遺傳學技術服務和產品。

1.TaqMan探針法針對染色體上的不同SNP位點分別設計PCR引物和TaqMan探針，進行實時熒光PCR擴增。探針的5’-端和3’-端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。當溶液中存在PCR產物時，該探針與模板退火，即產生了適合于核酸外切酶活性的底物，從而將探針5’-端連接的熒光分子從探針上切割下來，破壞兩熒光分子間的PRET，發出熒光。通常用于少量SNP位點分析。上海翼和應用生物技術有限公司按公司利用的就是此方案。公司公眾號：上海翼和生物SNP已經廣泛應用于人類致病基因篩選、致病風險診斷及預測、個體化藥物篩選等生物、醫學研究領域。

5.IlluminaBeadXpress法采用Illumina公司的BeadXpress系統進行批量SNP位點檢測，可以同時檢測1-384個SNP位點，往往用于基因組芯片結果確認，適合高通量檢測。微珠芯片具有高密度、高重復性、高靈敏度、低上樣量、定制靈活等特點，極高的集成密度，從而獲得極高的檢測篩選速度，在高通量篩選時可比較明顯降低成本。時間飛行質譜（MALDI-TOF）完成的SNP檢測準確率可達99.9%，除了準確性高、靈活性強、通量大、檢測周期短等優勢外，，有吸引力的應該還是它的性價比。飛行時間質譜平臺（MALDI-TOF）是國際通用的基因單核苷酸多態性（SNP）的研究平臺，該方法憑借其科學性和準確性已經成為該領域的新標準。SNP所表現的多態性只涉及到單個堿基的變異，這種變異可由單個堿基的轉換或顛換所引起。河南微衛星SSRSNP分型準確度高

一次研究的SNP大概有十幾個到幾十個，這是比較早期的做法。廣州STR/SSR基因SNP分型分析

SNP基因分型技術原理是PCR擴增含有SNP的基因組片段，主要特點是準確性高、靈活性強、通量大，主要方法是TaqMan探針法。首先通過PCR擴增含有SNP的基因組片段，然后通過序列特異性引物實現單堿基延伸，隨后樣品分析物與芯片基質共結晶后在真空管中受瞬時納秒(10-9s)強激光激發。核酸分子因此解吸附成為單電荷離子，由于電場中離子飛行時間與離子質量成反比，通過檢測核酸分子在真空管中的飛行時間而獲得樣品分析物的精確分子量，從而檢測出SNP位點信息。廣州STR/SSR基因SNP分型分析

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