TaqMan熒光探針法優點是操作簡單,準確性高(閉管進行,減少污染),判讀也很方便,認可度高;適合多樣本,少位點。但是其也有不可忽視的限制性,如探針合成耗時較長,價格昂貴,為了保證探針的穩定質量,一般大家會選擇A公司合成。TaqMan熒光探針法一般為只有幾個位點時適用,并且對樣本的質量要求較高,除了樣本無降解外,要需要濃度盡可能的一致。上海翼和應用生物技術有限公司,地址:上海市松江區龍騰路1015弄中星創意園2號502在基因組DNA中,任何堿基均有可能發生變異,因此SNP既有可能在基因序列內。廣東SNP分型技術服務
LDR連接酶檢測法優點是適用于任何多態性位點,基于雜交反應和連接反應,分型結果準確,可進行多重反應,性價比較高,且實驗靈活。但是相比TaqMan和直接測序法的單一位點檢測而言,LDR法可以實現多位點的同時檢測,提高檢測通量,因此前期需要一定時間構建多重分型方案。因此該方法非常適合相同分型方案,連續樣本的分型需求,提高實驗通量的同時降低分型單價。上海翼和應用生物技術有限公司總部在上海,2011年無錫成立分公司無錫翼和應用生物技術有限公司浙江SNP分型外包服務SNP自身的特性決定了它更適合于對復雜性狀與疾病的遺傳解剖以及基于群體的基因識別等方面的研究。
相信大家都聽過或已經接觸過一些常用的分型方法,如片段長度多態性(限制性內切酶)法,直接測序法,Taqman熒光探針法,LDR連接酶檢測反應法,競爭性等位基因特異性PCR法(KASP),二代測序法等,小E就針對以上幾種常用分型方法為大家做一個介紹和總結。上海翼和應用生物技術有限上海翼和**團隊富有開創精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領下,秉承“專業、協作、進取”的企業精神,為科研用戶提供性價比高、高質量可靠的遺傳學技術服務和產品。
上海翼和應用生物技術有限公司是一具有16年行業經驗的專業遺傳學服務供應商。公司的首席科學家為肖君華教授(東華大學生物科學與技術研究所教授;中國遺傳學會理事;上海市遺傳學會常務理事)。公司擁有兩大專業平臺:基于一代測序儀3730XL的PCR-LDRSNP分型平臺;基于多重PCR捕獲建庫技術的二代測序平臺。為順應市場需求,公司在2019年開拓了個人基因檢測業務。目前已開展心血管個體化用藥相關基因的檢測,孕婦葉酸及鈣代謝兩項基因檢測業務。兩項基因檢測均基于翼和一代測序平臺的PCR-LDRSNP基因分型方法。只是偶是做tumour的,所以提Cancer Research提得比較多。
1.TaqMan探針法針對染色體上的不同SNP位點分別設計PCR引物和TaqMan探針,進行實時熒光PCR擴增。探針的5’-端和3’-端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。當溶液中存在PCR產物時,該探針與模板退火,即產生了適合于核酸外切酶活性的底物,從而將探針5’-端連接的熒光分子從探針上切割下來,破壞兩熒光分子間的PRET,發出熒光。通常用于少量SNP位點分析。上海翼和應用生物技術有限公司按公司利用的就是此方案。公司公眾號:上海翼和生物SNP的文章還有很多,但是研究的思路和風格已經和以往不同了。上海微衛星標記SNP分型周期
單核苷酸多態性(SNP)是指相同或不同物種的個體DNA序列同一位置上存在單核苷酸差異的現象。廣東SNP分型技術服務
TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針,熒光基團連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應體系中加入2種不同熒光標記的探針,它們可以分別與2個等位基因完全配對。正常情況下,由于探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團緊鄰在一起,熒光被淬滅。隨著PCR有效的進行,與模板完全配對的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割,致使探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團分離,淬滅效應解除,報告熒光基團被,檢測到熒光信號,相反,如果模板不能完全配對的探針(另一種等位基因)不能被有效切割,因此檢測不到熒光信號,從而實現SNP位點的分型檢測。廣東SNP分型技術服務
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