上海翼和生物根據具體實驗規模,提供兩種檢測平臺,分別為:適合中低通量檢測的PCR-LDR分型服務和適合高通量的基于二代Hi-SNP分型服務。PCR-LDRSNP分型服務:PCR-LDR技術是PCR技術和LDR(LigaseDetectionReaction,連接酶檢測反應)想結合的檢測技術。LDR是利用高溫連接酶實現對基因多態性位點的識別。高溫連接酶一旦檢測到DNA與互補的兩條寡聚核苷酸接頭對應處存在著基因點突變類型的堿基錯配,則連接反應就不能進行,反之則可以進行連接反應。Hi-SNP結合多重PCR技術和高通量測序技術,對需要檢測的位點設計特異性引物,在單管內進行多重PCR擴增,不同的樣本以不同的Barcode引物區分。混合樣本后,在illumina等主流測序平臺上,對擴增子進行高通量測序。測序結果使用生物信息學方法,區分不同的樣本,,終獲得每個位點的SNP信息。高通量測序能一次對幾百萬條DNA分子進行序列測定,相比其他的SNP檢測技術,基于高通量測序的SNP分型具有更準確、更靈敏的特點。在基因組DNA中,任何堿基均有可能發生變異,因此SNP既有可能在基因序列內。蘇州基因SNP分型哪里好
高分辨率熔解(High-resolutionmelting,簡稱HRM)分析是一門新興的技術。它通過PCR之后的熔解曲線分析,就能檢測PCR片段的微小序列差異,從而應用在突變掃描、序列配對和基因分型等多個方面。憑借其速度和簡便性,高分辨率熔解這種方法正在迅速普及。其實雙鏈DNA的熔解分析可追溯到上世紀六十年代,當時是通過紫外吸收來監測的。分析需要幾微克的DNA,而樣品以0.1-1.0°C/分鐘的速率緩慢加熱,常常要花上幾個小時才能完成。后來,LightCycler定量PCR儀的出現,讓熒光熔解分析變得流行。樣品量因毛細管而縮減至納克級,且熔解速率更快,達0.1-1.0°C/秒,這樣熔解時間縮短至幾分鐘。當時使用的染料是SYBR?GreenI。蘇州SSRSNP分型公司SNP是多態性中的一種,只是進一步限定了差異只是單堿基。
LDR連接酶檢測法優點是適用于任何多態性位點,基于雜交反應和連接反應,分型結果準確,可進行多重反應,性價比較高,且實驗靈活。但是相比TaqMan和直接測序法的單一位點檢測而言,LDR法可以實現多位點的同時檢測,提高檢測通量,因此前期需要一定時間構建多重分型方案。因此該方法非常適合相同分型方案,連續樣本的分型需求,提高實驗通量的同時降低分型單價。上海翼和應用生物技術有限公司總部在上海,2011年無錫成立分公司無錫翼和應用生物技術有限公司
5.IlluminaBeadXpress法采用Illumina公司的BeadXpress系統進行批量SNP位點檢測,可以同時檢測1-384個SNP位點,往往用于基因組芯片結果確認,適合高通量檢測。微珠芯片具有高密度、高重復性、高靈敏度、低上樣量、定制靈活等特點,極高的集成密度,從而獲得極高的檢測篩選速度,在高通量篩選時可比較明顯降低成本。時間飛行質譜(MALDI-TOF)完成的SNP檢測準確率可達99.9%,除了準確性高、靈活性強、通量大、檢測周期短等優勢外,,有吸引力的應該還是它的性價比。飛行時間質譜平臺(MALDI-TOF)是國際通用的基因單核苷酸多態性(SNP)的研究平臺,該方法憑借其科學性和準確性已經成為該領域的新標準。SNP在人類基因組中普遍存在,平均每500~1000個堿基對中就有1個,估計其總數可達300萬個甚至更多。
上機測序后,每個樣本同一個SNP位置可以讀到數十或數百條reads(具體取決于測序通量),并且能夠清晰看到每條序列的具體信息,通過對SNP位點的聚類分析,實現位點基因型的判斷。大規模樣本中二等位基因reads比分布結果,每一個點一個樣本一個SNP位點的聚類結果,兩端表示純和,中間表示雜合(理想情況,1/0表示純和,0.5表示雜合)。上海翼和應用生物技術有限公司,上海翼和**團隊富有開創精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領下,秉承“專業、協作、進取”的企業精神,為科研用戶提供性價比高、高質量可靠的遺傳學技術服務和產品。微信公眾號:上海翼和生物突變一般不是一個個體全部細胞的變化。南京SSR基因SNP分型哪里好
DNA分子雜交、引物延伸、等位基因特異的寡核苷酸連接反應、側翼探針切割反應以及基于這些方法的變通技術.蘇州基因SNP分型哪里好
以上就是小E對幾種SNP分型技術的簡單介紹,大家可以看出分型技術多種多樣,各有各的優點和限制。大家需要綜合考慮實驗的各方面情況,如實驗規模(多少位點,多少樣本),實驗周期,實驗預算等,然后選擇一個適合自己實驗的分型技術。上海翼和**團隊富有開創精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領下,秉承“專業、協作、進取”的企業精神,為科研用戶提供性價比高、高質量可靠的遺傳學技術服務和產品。上海翼和**團隊富有開創精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領下,秉承“專業、協作、進取”的企業精神,為科研用戶提供性價比高、可靠的遺傳學技術服務和產品。蘇州基因SNP分型哪里好
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