DNA甲基化是指在DNA甲基轉移酶的作用下，使胞嘧啶的5位碳原子發生甲基化的生物化學過程。DNA胞嘧啶甲基化是一種穩定的表觀遺傳學標記，在調控特定基因表達、轉座子沉默、基因印記、X染色體失活以及基因組穩定性等多種生物學過程中發揮著重要作用。在動物中，DNA甲基化主要發生在CpG二核苷酸的背景下，約為70-80%的DNA甲基化。然而，剩余未發生甲基化的CpG位點則主要密集分布于基因的啟動子區域和the first exon region，被稱為CpG島(CpG island)，在基因表達的調控和基因突變上都可能發揮著重要作用。異常的DNA甲基化可參與調控疾病相關的分子信號通路,從而影響其正常功能。河南目標位點甲基化重測序準確度高

亞硫酸氫鈉修飾后測序法是一種對DNA進行亞硫酸氫鈉處理、聚合酶鏈反應擴增與DNA測序相結合的方法，能夠提供測定區域的序列信息，準確定位甲基化胞嘧啶位點；重亞硫酸鹽修飾后，甲基化胞嘧啶保持不變，但非甲基化胞嘧啶轉變為尿嘧啶，PCR擴增后為胸腺嘧啶，其將甲基化狀態的差異轉化成堿基的差異，從而對胞嘧啶的甲基化狀態進行分析；但在亞硫酸鈉處理的酸性環境下，單鏈特異性PCR模板穩定性下降，容易降解；并且模板鏈CG二核苷酸水平高易形成復雜的二級結構，常出現非特異性條帶，結合“巢式PCR法”能明顯提高擴增的特異度。河南目標位點甲基化重測序準確度高常規全基因組甲基化測序技術通過T4-DNA連接酶，在超聲波打斷基因組DNA*段的兩端連接接頭序列。

DNA甲基化可以抑制基因表達。其機制是當DNA甲基化出現在啟動子區，其會強化啟動子序列的異染色質化（染色體擰巴在一起），而使轉錄起始復合物無法接近和結合，從而強化基因的轉錄抑制。只有保持開放性常染色質狀態的轉錄起始位點，才能保證轉錄起始蛋白復合物可接近并結合這個區域，從而保證基因的轉錄表達。當DNA甲基化出現在編碼基因不同區域的時候（上游，基因區或下游），其對基因表達的影響也是不同的。同時，DNA甲基化不僅只影響基因轉錄，實際上其與組蛋白修飾、DNA突變、小RNA表達等都有非常復雜的相互調控作用。

DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變，從而控制基因+表達。在甲基轉移酶的催化下，DNA的CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基，形成5－甲基胞嘧啶，這常見于基因的5'-CG-3'序列。大多數脊椎動物基因組DNA都有少量的甲基化胞嘧啶，主要集中在基因5’端的非編碼區，并成簇存在。甲基化位點可隨DNA的復制而遺傳，因為DNA復制后，甲基化酶可將新合成的未甲基化的位點進行甲基化。DNA的甲基化可引起基因的失活。DNA 甲基化能關閉某些基因的活性，去甲基化則誘導了基因的重新活化和表達。

上海翼和生物通過亞硫酸氫鹽（bisulfite）處理，用多重PCR擴增目的片段，添加barcode和測序通用接頭，在Illumina X10二代測序平臺對PCR產物進行高通量測序，利用生物信息學方法，精確定量計算目標區間內的甲基化位點的甲基化狀態，在完成目標區域檢測的同時大幅降低研究費用。Hi-MethylSeq結合了亞硫酸鹽轉換、靶向擴增子高通量測序技術，可實現多區段、多位點的甲基化精確定量分析。本方法適用于感興趣的目的片段的甲基化研究，在大樣本中進一步確認全基因組甲基化研究挑選的陽性位點。重亞硫酸鹽處理是甲基化分析中基因組DNA處理的金標準，是一個化學過程，可造成DNA的損傷，很難同時實現100%的轉換效率和保持DNA的完整性，二者需要做出一定的平衡。Hi-MethylSeq在CpG島之外選取3段內參序列中的C作為內對照，準確評估樣本的轉化率。基因甲基化幾乎發生在CpG島（70%啟動子）會損害轉錄因子結合，發生在基因區間能抑制有害元件的表達。河南目標位點甲基化重測序準確度高

全基因組甲基化測序:利用Bisulfite(亞硫酸鹽)對基因組進行處理后上機測序。河南目標位點甲基化重測序準確度高

DNA甲基化過程在一些生物學現象中起重要作用。例如，在原核生物中，它參與毒力、細胞周期調控、基因表達和對外源 DNA 導入的保護（DNA-宿主特異性）等過程。在高等真核生物中，DNA 甲基化參與調控染色體穩定性、印記、X 染色體失活和cancer 變等多個細胞過程。在哺乳動物中，DNA 甲基化主要發生在胞嘧啶堿基的第五個碳原子上，形成 5-甲基胞嘧啶或 5-甲基胞嘧啶核苷 (5-mC)。DNA甲基化幾乎只存在于CpG二核苷酸上，是一個關鍵的表觀遺傳標記和基因表達調控因子。基因啟動子或 CpG 島處的甲基化 CpG 簇與基因失活有關。DNA 甲基化由一個被稱為 DNA 甲基轉移酶并包括 DNMT1、DNMT3a 和 DNMT3b 的酶家族催化。DNMT3a 和 DNMT3b是從頭合成的甲基轉移酶，能夠甲基化之前未甲基化的 CpG二核苷酸。相反，DNMT1是一種維持性甲基轉移酶，在復制過程中修飾半甲基化的 DNA。河南目標位點甲基化重測序準確度高

上海翼和應用生物技術有限公司是一家第三方檢測服務；生物專業領域內的技術開發、技術咨詢、技術服務；健康衰老評估；大健康檢測；遺傳學技術服務；生物醫藥行業質控檢測技術技術服務；小鼠遺傳品系鑒定；轉基因小鼠基因型鑒定；細胞點突變檢測；細胞端粒長度和端粒酶活性檢測。的公司，是一家集研發、設計、生產和銷售為一體的專業化公司。公司自創立以來，投身于細胞組織小鼠質控，大健康檢測，生物技術服務，是醫藥健康的主力軍。翼和生物繼續堅定不移地走高質量發展道路，既要實現基本面穩定增長，又要聚焦關鍵領域，實現轉型再突破。翼和生物始終關注醫藥健康行業。滿足市場需求，提高產品價值，是我們前行的力量。