什么是細胞系鑒定?所謂細胞系鑒定即通過STR(短串聯重復)圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后,細胞系可以通過定期的檢測,以防止出現細胞系被誤認或交叉污染的情況。為什么要進行細胞系鑒定?由于細胞系發生交叉污染或身份誤認,將導致實驗數據的無效或數據誤導。NIH已發出公告,討論細胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來越多的的期刊要求文章發表前、需提供細胞鑒定數據。細胞系用錯的概率有多大?據ATCC估計,1977年錯誤使用細胞的概率是16%,1999年是18%。根據我們的經驗,國內細胞系用錯的概率不低于20%。即如果一個研究所有二十個課題組,按概率估計,有4個課題組用的細胞是錯的。中國科學院昆明細胞庫檢查出錯誤鑒定和交叉污染的細胞結果。蘇州小鼠細胞STR鑒定數據庫比對
全球因為細胞系用錯浪費了多少錢?據不完全統計,只就HEp-2與Int-407這兩株細胞(它們實際上是Hela),直接浪費的投入是7億美金,間接浪費了7億美金。因為用錯細胞,產生了多少垃圾文章?據不完全統計,只就HEp-2與Int-407這兩株細胞(它們實際上是Hela),前者發表了近6000篇SCI(17萬次引用),后者發表了近1400篇SCI。都是垃圾文章。用錯細胞時間極為長的持續了多少時間?瑞典有一個科學家,在三十年的時間里都以為自己的細胞是正確的,直到做了細胞鑒定之后發現是錯誤的。越早發現錯誤越好,鑒定之后是正確的話,自己也放心。廣州小鼠STR鑒定送樣要求細胞系用錯的概率有多大?
如何根據STR數據判斷細胞系的身份?收到細胞系鑒定結果以及STR信息,可以與參考數據庫進行比對。如果細胞樣本的每個STR位點和參考細胞STR位點都能重合匹配,即說明該細胞系正確,反之則說明你的細胞系可能被錯誤標記,交叉污染或發生遺傳不穩定。一般說來,匹配度≥80%即可認為該細胞系正確,匹配度<80%則說明該細胞系的來源需要被懷疑。如果細胞系被鑒定出發生交叉污染或錯誤標記,則需要拿更早代數的細胞進行鑒定,從而找到問題的起源或者直接從可靠的機構購買一株新的細胞系。
當你準備將你的科研成果進行發表時,卻被投稿雜志要求提供細胞鑒定報告,此時你所使用的細胞是否存在交叉污染,可能導致你幾個月甚至是幾年的研究成果化為烏有。新買的細胞或者是已凍存多年未用的細胞,是否被污染,用它做實驗得到的結果是真實的嗎,用未經細胞鑒定過的細胞,花費大量人力,物力得到的結論也許都會被浪費掉。目前細胞已經是生物研究中不可或缺的一部分了,有的細胞可能從公司購買,有的細胞也許從他人實驗室饋贈得到,但是這些細胞的傳代次數,培養條件,有沒有被污染卻很難確定。選擇正確的細胞,是實驗成功的一半,不要等到已經花了大量精力后才發覺要從頭再來。依據該標準,可以通過多重熒光PCR技術,對人源8個STR位點以及1個性別決定位點進行檢測。
翼和采用PCR 檢測法,含有化學修飾熱啟動酶的 2×PCR mix,配以 dUTP 和UDG 酶,可很大程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,有效防止 PCR 產物的交叉污染。對細胞培養樣本內支原體16S rRNA 基因高度保守區域特異性片段進行擴增檢測,與含有支原體的陽性標準品和不含有支原體的陰性標準品比對,鑒定支原體污染的現象,能夠檢測包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多種支原體。建干細胞系并做規定項目的鑒定,顯然是快速發表論文的一種方式,是廣大醫生朋友喜聞樂見的。廣州STR鑒定送樣要求
本文使用的Hela**細胞,由上海翼和應用生物技術有限公司鑒定。蘇州小鼠細胞STR鑒定數據庫比對
這是一個比較悲慘、充滿黑色幽默的故事,其教訓也是深刻的。在2001年,科學家在一篇論文里報道了一株新建立的大鼠(rat)視網膜神經節的細胞系(留個印象是大鼠來源的),命名為RGC-5。在隨后的十幾年時間里,至少230篇論文的研究與假設是建立在這株細胞系上。這株細胞系有很多好的地方,它是視網膜神經節的細胞系,對于眼科學的研究有一株大鼠的永生細胞很重要。一批有名的科學家在此基礎上做出很多重大發現,論文發表在諸如PNAS之類的雜志上,特別是與青光眼有關的領域(你如果是這個領域的,要當心了)。蘇州小鼠細胞STR鑒定數據庫比對
上海翼和應用生物技術有限公司擁有第三方檢測服務;生物專業領域內的技術開發、技術咨詢、技術服務;健康衰老評估;大健康檢測;遺傳學技術服務;生物醫藥行業質控檢測技術技術服務;小鼠遺傳品系鑒定;轉基因小鼠基因型鑒定;細胞點突變檢測;細胞端粒長度和端粒酶活性檢測。等多項業務,主營業務涵蓋細胞組織小鼠質控,大健康檢測,生物技術服務。目前我公司在職員工以90后為主,是一個有活力有能力有創新精神的團隊。公司以誠信為本,業務領域涵蓋細胞組織小鼠質控,大健康檢測,生物技術服務,我們本著對客戶負責,對員工負責,更是對公司發展負責的態度,爭取做到讓每位客戶滿意。公司深耕細胞組織小鼠質控,大健康檢測,生物技術服務,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領域拓展。