將待檢測片段（包含待測SNP位點(diǎn)）進(jìn)行PCR擴(kuò)增并直接進(jìn)行測序是SNP檢測方法中，準(zhǔn)確的一種，堪稱SNP分型的“金標(biāo)準(zhǔn)”。獲得測序峰圖，純和位點(diǎn)為單峰，而雜合位點(diǎn)則為套峰，因此通過查看測序峰圖很容易將基因型區(qū)分開來。直接測序法不僅可用于對已知位點(diǎn)的檢測，還可用于發(fā)現(xiàn)未知的SNP位點(diǎn)。直接測序法的優(yōu)點(diǎn)是結(jié)果準(zhǔn)確，能發(fā)現(xiàn)未知位點(diǎn)，但是其缺點(diǎn)是通量低，成本高。因此直接測序法適用于少位點(diǎn)，少樣本的分型規(guī)模，當(dāng)然土豪實(shí)驗(yàn)室除外！所以這種方法也很難在商業(yè)化大規(guī)模的分型實(shí)驗(yàn)中得到推廣。探針的5’-端和3’-端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。北京微衛(wèi)星SSRSNP分型報(bào)告

目前市場上有多個(gè)廠家提供HRM分析的儀器，包括IdahoTechnology、Corbett（QIAGEN）、Roche等，有些是HRM的儀器，有些則是附帶HRM功能的定量PCR儀。HRM的發(fā)明者—美國猶他大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Wittwer實(shí)驗(yàn)室曾評(píng)估了市場上多臺(tái)儀器在基因分型和突變掃描上的性能1。他們發(fā)現(xiàn)，對于大部分儀器的準(zhǔn)確基因分型來說，主要限制在于平板上的空間溫度差異（Tm的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.020-0.264°C）。其它差異如數(shù)據(jù)密度、信噪比和熔解速率，也會(huì)影響雜合體的掃描。經(jīng)過比較發(fā)現(xiàn)，空氣加熱型儀器以及樣品溫度單獨(dú)控制的儀器有著更低的Tm標(biāo)準(zhǔn)偏差（0.018-0.065），而加熱塊型儀器則在0.092-0.274。北京微衛(wèi)星SSRSNP分型報(bào)告DNA芯片技術(shù)是近年來新開發(fā)的一種DNA序列變異檢測工具。

1.TaqMan探針法針對染色體上的不同SNP位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)PCR引物和TaqMan探針，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增。探針的5’-端和3’-端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。當(dāng)溶液中存在PCR產(chǎn)物時(shí)，該探針與模板退火，即產(chǎn)生了適合于核酸外切酶活性的底物，從而將探針5’-端連接的熒光分子從探針上切割下來，破壞兩熒光分子間的PRET，發(fā)出熒光。通常用于少量SNP位點(diǎn)分析。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司按公司利用的就是此方案。公司公眾號(hào)：上海翼和生物

1、SNP數(shù)量多，分布比較常見。據(jù)估計(jì)，人類基因組中每1000個(gè)核苷酸就有一個(gè)SNP，人類30億堿基。。有300萬以上的SNPs.SNP遍布于整個(gè)人類基因組中，根據(jù)SNP在基因中的位置，可分為基因編碼區(qū)SNPs（Coding-regionSNPs，cSNPs）、基因周邊SNPs（PerigenicSNPs，pSNPs）以及基因間SNPs（IntergenicSNPs，iSNPs）等三類。2、SNP適于快速、規(guī)模化篩查。組成DNA的堿基雖然有4種，但SNP一般只有兩種堿基組成，所以它是一種二態(tài)的標(biāo)記，即二等位基因（biallelic）。由于SNP的二態(tài)性，非此即彼，在基因組篩選中SNPs往往只需+/-的分析，而不用分析片段的長度，這就利于發(fā)展自動(dòng)化技術(shù)篩選或檢測SNPs.SNP這個(gè)概念被提出時(shí)，是為了描述一個(gè)群體內(nèi)不那么罕見的堿基突變。

上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是一具有16年行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)遺傳學(xué)服務(wù)供應(yīng)商。公司的首席科學(xué)家為肖君華教授（東華大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)研究所教授；中國遺傳學(xué)會(huì)理事；上海市遺傳學(xué)會(huì)常務(wù)理事）。公司擁有兩大專業(yè)平臺(tái)：基于一代測序儀3730XL的PCR-LDRSNP分型平臺(tái)；基于多重PCR捕獲建庫技術(shù)的二代測序平臺(tái)。為順應(yīng)市場需求，公司在2019年開拓了個(gè)人基因檢測業(yè)務(wù)。目前已開展心血管個(gè)體化用藥相關(guān)基因的檢測，孕婦葉酸及鈣代謝兩項(xiàng)基因檢測業(yè)務(wù)。兩項(xiàng)基因檢測均基于翼和一代測序平臺(tái)的PCR-LDRSNP基因分型方法。DNA分子雜交、引物延伸、等位基因特異的寡核苷酸連接反應(yīng)、側(cè)翼探針切割反應(yīng)以及基于這些方法的變通技術(shù).無錫STR基因SNP分型周期

傳統(tǒng)的RFLP只能檢測到SNP的一部分，測序技術(shù)既費(fèi)時(shí)費(fèi)力。北京微衛(wèi)星SSRSNP分型報(bào)告

這種熔解分析只能區(qū)分在片段大小和GC含量上差別較比較明顯的DNA序列，比如檢查PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中是否存在引物二聚體及其他非特異性的擴(kuò)增。如果要區(qū)分SNP，分辨率還不夠。為什么呢？這里有必要先介紹一下飽和染料和非飽和染料。SYBRGreenI就屬于非飽和性染料，由于它對PCR的抑制作用，在實(shí)驗(yàn)中的使用濃度很低，遠(yuǎn)未將DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的小溝飽和。這樣，DNA雙鏈高溫變性時(shí)，單鏈部分的熒光染料分子發(fā)生重排，熒光染料分子重新結(jié)合到雙鏈DNA的空置位點(diǎn)，造成熒光信號(hào)沒有變化，因此出現(xiàn)假陰性，特異性下降。北京微衛(wèi)星SSRSNP分型報(bào)告

上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是一家服務(wù)型類企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。翼和生物是一家私營有限責(zé)任公司企業(yè)，一直“以人為本，服務(wù)于社會(huì)”的經(jīng)營理念;“誠守信譽(yù)，持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測，生物技術(shù)服務(wù)，價(jià)格合理，品質(zhì)有保證，深受廣大客戶的歡迎。翼和生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念，打造高指標(biāo)的服務(wù)，引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。