DNA甲基化作為一種重要的表觀修飾，在調(diào)控基因的時空特異性表達中扮演著關(guān)鍵的角色，參與了X染色體失活、基因組印記和重復序列抑制等諸多生命過程。哺乳動物細胞的DNA甲基化主要發(fā)生在CpG二核苷酸對的C（胞嘧啶）上，并在有絲分裂過程中得以相對穩(wěn)定的維持，這對細胞保持譜系特性有著重要的意義。上海翼和應用生物技術(shù)有限公司自主研發(fā)的Hi-MethylSeq技術(shù)，可對對大規(guī)模群體的候選基因甲基化水平進行檢測。上海翼和生物是上海市遺傳學會理事單位。目標區(qū)域甲基化重測序（Hi-Methylseq）結(jié)合了亞硫酸鹽轉(zhuǎn)換、靶向擴增子高通量測序技術(shù)。成都目標區(qū)間甲基化重測序哪里好

目標區(qū)域甲基化重測序（Hi-MethylSeq），又叫重亞硫酸鹽擴增子測序（Bisulfite Amplicon Sequencing， BSAS）。在前期全基因組甲基化測序、全基因組甲基化芯片等工作基礎(chǔ)上，或者依據(jù)文獻報道目的基因甲基化與性狀/疾病關(guān)聯(lián)，選擇感興趣的目的區(qū)間或候選基因，利用Hi-MethylSeq技術(shù)對大規(guī)模群體的候選基因甲基化水平進行檢測。Hi-MethylSeq技術(shù)通過亞硫酸氫鹽（bisulfite）處理，用多重PCR擴增目的片段，添加barcode和測序通用接頭，在Illumina X10二代測序平臺對PCR產(chǎn)物進行高通量測序，利用生物信息學方法，精確定量計算目標區(qū)間內(nèi)的甲基化位點的甲基化狀態(tài)，在完成目標區(qū)域檢測的同時大幅降低研究費用。成都目標區(qū)間甲基化重測序哪里好DNA甲基化屬于表觀遺傳的范疇。

DNA甲基化可以抑制基因表達。其機制是當DNA甲基化出現(xiàn)在啟動子區(qū)，其會強化啟動子序列的異染色質(zhì)化（染色體擰巴在一起），而使轉(zhuǎn)錄起始復合物無法接近和結(jié)合，從而強化基因的轉(zhuǎn)錄抑制。只有保持開放性常染色質(zhì)狀態(tài)的轉(zhuǎn)錄起始位點，才能保證轉(zhuǎn)錄起始蛋白復合物可接近并結(jié)合這個區(qū)域，從而保證基因的轉(zhuǎn)錄表達。當DNA甲基化出現(xiàn)在編碼基因不同區(qū)域的時候（上游，基因區(qū)或下游），其對基因表達的影響也是不同的。同時，DNA甲基化不僅只影響基因轉(zhuǎn)錄，實際上其與組蛋白修飾、DNA突變、小RNA表達等都有非常復雜的相互調(diào)控作用。

WGBS能為基因組DNA甲基化時空特異性修飾的研究提供重要技術(shù)支持，能廣泛應用在個體發(fā)育、衰老和疾病等生命過程的機制研究中，也是各物種甲基化圖譜研究的優(yōu)先方法。常規(guī)全基因組甲基化測序技術(shù)通過T4-DNA連接酶，在超聲波打斷基因組DNA段的兩端連接接頭序列，連接產(chǎn)物通過重亞硫酸鹽處理將未甲基化修飾的胞嘧啶C轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏，進而通過接頭序列介導的 PCR 技術(shù)將尿嘧啶U轉(zhuǎn)變?yōu)樾叵汆奏。上海翼和是上海市遺傳學會理事單位，上海市****，至今已有十六年的歷史。表觀遺傳學研究已經(jīng)證實了特定基因區(qū)域的DNA甲基化修飾對于染色體構(gòu)象、基因表達調(diào)控機制有著重要影響。

DNA甲基化（DNA methylation）為DNA化學修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結(jié)合一個甲基基團。大量研究表明，DNA甲基化能引起染結(jié)構(gòu)、DNA構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變，從而控制基因表達。WGBS是基于重亞硫酸鹽的甲基化分析方法，首先通過Bisulfite對樣本DNA進行處理，將未甲基化的C堿基轉(zhuǎn)化為U堿基，而甲基化的C堿基則不會改變，進行PCA擴增后U堿基會變成T，與原本甲基化的C堿基區(qū)分開，再結(jié)合高通量測序技術(shù)，可繪制單堿基分辨率的全基因組DNA甲基化圖譜。全基因組DNA甲基化測序是用 Bisulfite 處理DNA序列。成都目標區(qū)間甲基化重測序哪里好

WGBS（Whole Genome Bisulfite Sequence）全基因組甲基化測序.成都目標區(qū)間甲基化重測序哪里好

亞硫酸氫鹽測序法用亞硫酸氫鈉對 DNA 進行化學處理會使甲基化特異性序列變異，從而可以通過NGS進行定位和量化，主要的DNA甲基化數(shù)據(jù)分析流程：獲得DNA甲基化數(shù)據(jù)之后，首先，需要對數(shù)據(jù)進行處理和質(zhì)量的基本控制，包括原始測序和芯片數(shù)據(jù)的讀取、轉(zhuǎn)換到產(chǎn)生準確的DNA甲基化圖譜；其次，需要對DNA甲基化位點的結(jié)果進行可視化，并且利用統(tǒng)計學方法鑒定樣本特異性差異的DNA甲基化位點；第三，驗證 DNA 甲基化差異位點，并且對其進行生物學解釋。成都目標區(qū)間甲基化重測序哪里好

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